5％戊二醛中，用于制作扫描电镜标本，观察内皮覆盖情况；一份塑料包埋，碳化钨钢刀切片，分别行elastic-van Gieson和Masson染色，形态学观察，另一份用于第三部分分子生物学指标检测。结果发现，术后28天，对照组血管内膜表面已完全内皮化，210μg DT包被支架组＞90％内皮化；光镜结果显示，各组血管损伤程度无显著性差异(P＞0.05)。内弹力板层包绕面积在各组间无差别。支架置入后28天，对照组内膜明显增厚，ECM面积占内膜总面积的40％，6个月后增加到91％(P＜0.001)。DT呈剂量依赖性减少内膜ECM比例。血管参数分析显示，各指标在小剂量组与对照组差异均无显著性(P＞0.05)； 术后28天，大、中剂量组的平均新生内膜厚度、新生内膜面积无差别(P>0.05)， 但均大于小剂量组和对照组(P<0.OOI);DT呈浓度依赖性增加管腔面积(P0.05)。上述结果表

明，60林gDT对预防再狭窄无效，在支架置入术后6个月内，中、高剂量DT(130陀， 210林g)包被支架呈剂量依赖性地抑制支架术后内膜增生，其机制与DT降低内膜 SMC聚集和减少ECM沉积有关。 第二部分，设计DT与32P联合包被支架，置入犬无病变的冠状动脉，期望经 两个不同途径，更彻底地抑制内膜增生。分别制作蛋白涂层的DT包被支架(210林留 以及 支架)，’ZP包被支架(20林ei/支架)和DT与犯P联合包被支架(210林g+20林ei/支 架)置入犬冠状动脉，于术后28天和6个月行冠状动脉造影后处死动物，取材， 分别制作扫描电镜标本和组织切片，行elastic一van Gieson和Masson染色，形态学 观察，进行参数测量、计算。结果发现，术后6个月，DT包被支架组血管内膜表 面完全内皮化，联合包被支架组内皮化程度与32P支架组相似(80%)。Masson染 色显示，各治疗组抑制内膜增生的同时伴有ECM含量的降低，联合组最低。血管 参数分析发现，术后28天和6个月，各指标在治疗组与对照组差异均有显著性意

义(尸<0.05)，但管腔面积大于32P和nT组(尸.05)。术后28天，联合包被组的平均新生内膜厚度虽小 于32P组(尸.05);6个月后不仅联合包被组对内 膜增生的抑制程度大于32P和DT组(尸
背景和目的:肥胖已在全球范围内广泛流行,肥胖尤其是腹型肥胖常与高血压、糖尿病、高脂血症等多个心血管疾病危险因子在同一个体中聚集,导致心脑血管疾病发生或加重,称为“代谢综合症(MS)”或“死亡四联症”,使得肥胖的研究已越来越引起重视,成为世界医学的一个热点问题。肥胖是环境因素和遗传因素相互作用的结果,发病因素极为复杂,发生机制仍不完全清楚。目前已有的食物所诱导的肥胖动物模型,可能与人类所产生的肥胖最为接近,但仍存在表型较单一的问题,常可有体重增加和血脂改变,却很少伴有高血压。因此,制备能更好模拟人类肥胖发病状态,具有肥胖、高血压和多种代谢紊乱的MS大鼠模型,对于研究肥胖特征及其发病机制至关重要。 许多 还有 肾素血管紧张素系统(RAS),是一个重要的机体血压及水电解质平衡调节系统。近年研究发现,除循环RAS外,局部组织如心脏、血管壁、脑、肾等也能合成AGT、肾素、ACE,能有效地生成AngⅡ,具有独立的RAS系统。而且这种AngⅡ起自分泌、旁分泌或近分泌作用,在器官结构的病理改变以及对组织生长、纤维化和炎性反应等功能中起重要作用。AngⅡ与AT1R结合可激活细胞内信号通路,其中包括Rho/ROCK和ERK/p38MAPK通路,介导RAS系统的大部分生物效应,如收缩血管、升高血压,促进醛固酮分泌,以及组织重构,细胞增生、肥大等。已有报道,脂肪细胞中存在RAS系统主要组分的mRNA表达,提示脂肪组织中也有局部RAS系统的存在。目前认为脂肪组织中RAS活性增高,可能在肥胖相关的高血压发病机制中占重要地位,并对脂肪组织的生长产生影响,但其作用途径不明。那么要思考的问题是肥胖者脂肪组织中RAS系统各组分的表达是否不同,这与脂肪细胞的肥大增生是否相关?脂肪细胞增殖与肥大的细胞内信号通路是否与其他组织一样,存在Rho/ROCK和ERK/p38MAK途径的激活,不同部位的脂肪组织是否存在差异?

本课题从整体到组织再到分子水平,分三部分进行研究:通过社区人群中肥胖的筛查,了解国人肥胖的特征;建立与人类肥胖特征更为接近的动物模型,观察其脂肪组织生长特点;进而探讨脂肪组织局部RAS系统的表达及RhoA/ ROCK和ERK/p38信号途径在肥胖发生(脂肪组织生长)中的病理生理作用,为寻找肥胖及MS的防治新途径提供实验依据。 方法:(一)流行病学调查:采用现场调查的方法,筛查社区30岁以上人群共1449人,男730人,女719人。检测指标:身高、体重、血压、腰围(WC)、臀围、腰臀比、体重指数(BMI)和75g葡萄糖耐量实验、体脂百分含量(FAT%)测定。肥胖和超重诊断:分别按WHO、亚太地区和中国成人BMI分类标准分析。糖尿病及高血压诊断:按1999年WHO标准。(二)动物模型研究:1. 健康8周龄雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组(NC)和MS组,每组15只,以49%高脂结合高盐饮食复制MS大鼠模型。2. 测量血压、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂(TG)和游离脂肪酸(FFA)。3. 肥胖特征指标:体重、腹围、Lee’s指数、各部位白色脂肪组织(WAT)重量、内脏脂肪(VAT)系数、测量脂肪细胞的面积、大脂肪细胞的数量。4. 光镜下观察白色脂肪组织(WAT)、棕色脂肪组织(BAT)以及肝脏、骨骼肌组织病理切片。(三)分子生物学实验:RT-PCR及Western blot检测各部位脂肪组织AGT,Renin,ACE,ACE2,Ang II(包括AT1和AT2)以及RhoA,ROCK,ERK1/2和p38的表达。 主要研究结果: (一) 流行病学调查 超重及肥胖患病率:30岁以上人群,超重及肥胖患病率分别为41.5%和10.