5、具有Ph染色体以外的其他异常核型患者对药物反应差。
蛋白激酶是一类能够将下游底物磷酸化的蛋白,可分为丝/苏氨酸蛋白激酶和酪氨酸蛋白激酶。蛋白磷酸化作用在细胞内信号传导过程中发挥着重要的作用。其作为关键的调节因素在肿瘤形成的各个方面,如增殖、侵入、转移、血管新生等,都发挥重要的作用。随着肿瘤细胞信号传导途径的揭示,一些在肿瘤发生发展中起关键作用的蛋白激酶已经成为筛选抗Selleckchem 3 MA肿瘤药物的重要靶点,蛋白激酶抑制剂也成为近年来抗肿瘤药物开发研究的热点,已经有一些蛋白激酶抑制剂投放市场,还有数目众多的蛋白激酶抑制剂处于临床前和临床研究阶段。 Aurora A是丝/苏氨酸蛋白激酶Aurora家族成员之一,其定位于中心体和纺锤体附近,在细胞有丝分裂中主要负责调节中心体成熟、纺锤体组装,促进有丝分裂启动以及促进核膜破裂。Auror通常a A在多种肿瘤组织中均高表达,其高表达会导致基因的不稳定和肿瘤的发生,同时与某些肿瘤的预后相关。近年来,Aurora激酶抑制剂作为抗肿瘤候选药物受到广泛的关注,已有一些处于临床研究中,且表现出良好的抗肿瘤活性。 本论文研究的目的是拟在分子水平和细胞水平建立蛋白激酶抑制剂的筛选模型,可用于后续抗肿瘤药物的筛选工作。 一方面,在分子水平体外利用昆虫Ipatasertib分子量杆状病毒表达体系表达Aurora A蛋白激酶,用Ni-NTA柱对表达的蛋白进行纯化。再用考马斯亮蓝染色和Western blot方法对表达的重组蛋白进行鉴定。结果表明:得到了Aurora A的重组蛋白。基于荧光偏振的方法,摸索各种重要因素酶用量、ATP和底物的条件,确定了相应的浓度。同时用阳性化合物Aurora kinase inhibitorⅡ对模型进行评价,在分子水平成功建立了蛋白激酶Aurora A的抑制剂筛选模型。