3 应用RNA-Seq对化疗药物作用后的结肠癌细胞进行测序检测。4 应用Western Blotting、RT-PCR方法对RNA

3.应用RNA-Seq对化疗药物作用后的结肠癌细胞进行测序检测。4.应用Western Blotting、RT-PCR方法对RNA-seq结果进行验证,并检测转染ELF3si RNA及应用低剂量5-FU再次处理后的结肠癌细胞CD44分子表达变化。5.应用Western Blotting、MTT、克隆形成等实验检测姜黄素对CD44~+结肠GDC-0068体外癌细胞的抑制作用。结果生物信息学分析结果显示结肠癌组织中CD44分子表达水平显著高于癌旁正常组织,低剂量化疗药物处理结肠癌细胞一段时间后CD44表达水平明细升高,并且结肠癌细胞干性特征增强。RNA-Seq结果提示化疗药物处理可致结肠癌细胞中ETS转录因子家族成员之一的ELF3表达水平出现特异性增高,随后的RT-SHP099DMSO溶解度PCR以及Western blotting实验也证实了上述结果,在结肠癌细胞转染ELF3si RNA并应用低剂量化疗药物5-FU处理后,发现细胞的CD44表达水平降低。此外本研究发现姜黄素可抑制结肠癌细胞的增殖能力,对化学耐药性的结肠癌细胞也具有显著的抑制作用,姜黄素可抑制结肠癌细胞的克隆形成和迁移能力并减弱结Rigosertib购买肠癌细胞的干性特征,姜黄素还可降低结肠癌细胞表面CD44分子表达水平,对CD44~+结肠癌细胞具有特异性抑制作用。结论1.低剂量化疗药物处理可促进结肠癌细胞CD44分子表达水平升高。2.低剂量化疗药物处理可特异性上调ETS家族成员之一ELF3转录因子,ELF3与结肠癌细胞表面CD44分子表达水平升高相关。3.姜黄素对结肠癌细胞具有抑制作用,特别是对CD44~+结肠癌细胞具有显著抑制作用。

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