22±12.3ng/dl(n=3),雌激素浓度0.05)。FSH组睾酮水平和基础培养基组未见明显统计学差异(p>0.05)，在这三组中均未检测到雌激素水平的改变。结论：通过本实验的分离和培养方法可以得到大量贴壁生长的卵泡膜间质细胞，其中很少有颗粒细胞的混杂，此方法可以快速、高效的进行小鼠卵泡膜间质细胞的分离培养。
目的：探讨快速眼动睡眠剥夺（REMSD）对小鼠海马tau蛋白磷酸化、磷酸化p38MAPK及GSK3β的影响。 方法：将32只8周龄SPF级雄性健康昆明小鼠随机分为对照组、REMSD24h、REMSD48h及REMSD72h组。对照组置于普通笼中饲养，REMSD组置于SD箱中饲养，各组在开始实验前先让小鼠熟悉环境3d。在实验后，迅速颈椎脱臼处死小鼠，取出脑组织经固定、脱水及包埋之后做成石蜡切片，用HE染色法观察各组小鼠海马形态结构的变化。利用免疫组织法观察总tau蛋白（T-tau）、磷酸化tau蛋白（p-tau）、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38MAPK）及糖原合成激酶-3β（GSK3β）在小鼠海马组织的表达情况，并用Image-Proplus6.0图像分析软件测定平均光密度值（OD值）来反映各项指标表达的变化。
结果：HE染色显示在光镜下对照组海马内神经元均匀分布，形态规则，排列致密、整齐，细胞核结构清楚，核内染色质清晰可见，呈蓝色；REMSD组中，剥夺睡眠24h后海马内神经元结构即发生改变，细胞排列欠整齐，REMSD72h组细胞结构损伤较明显，细胞排列疏松，部分细胞呈萎缩状，胞浆呈嗜酸变性，细胞核结构不清，染色质颗粒欠清晰，部分神经元胞浆减少、细胞核固缩浓染。免疫组化结果显示，无论对照组或是REMSD组，T-tau平均OD值均无明显差异。对照组、REMSD24h、48h及72h组小鼠海马p-tau平均光密度（OD值）分别为0.1040.007、0.1560.027、0.1800.030和0.1880.032（P＜0.05），REMSD各组均高于对照组，差异有统计学意义；p-p38MAPK平均OD值分别为0.1690.028、0.2090.020、0.2390.017和0.2660.035（P＜0.05），REMSD各组均高于对照组，且随着时间的延长平均OD值也增加；GSK3β平均OD值分别为0.0840.009、0.0900.008、0.1030.011与0.1170.013（P＜0.05），REMSD48h及72h组均高于对照组与REMSD24h组，同时72h组高于48h组，而REMSD24h组与对照组之间差异无统计学意义。
selleck激酶抑制剂 或者 结论：REM睡眠剥夺可以引起tau蛋白磷酸化水平的增高，其中可能有p38MAPK与GSK3β的参与。
目的探讨在乙酸诱导的急性内脏痛模型中,小鼠前扣带回皮质(ACC)内磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达的时空变化及可能作用。 方法本研究采用正常的成年雌性昆明小鼠作为研究对象。实验组小鼠腹腔注射0.6%的乙酸(10ml/kg)建立急性内脏痛模型,对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。实验以腹壁收缩次数为指标观察动物的内脏痛反应。采用免疫组织化学和Western Blot检测小鼠ACC内p-ERK1/2表达的时程变化,免疫荧光双标法检测p-ERK1/2在GABA能神经元的表达情况。为了探讨ERK1/2的活化对乙酸诱导的小鼠内脏疼痛及痛相关的焦虑样行为的影响,在注射乙酸30分钟前皮下给予小鼠MEK的抑制剂SL327(30mg/kg)抑制ERK1/2的磷酸化,然后检测小鼠的痛反应及痛相关的焦虑样行为。
结果腹腔注射乙酸后小鼠前扣带回皮质区p-ERK1/2呈双相性增高表达：腹腔注射0.6%的乙酸后1小时内小鼠的腹壁收缩次数明显高于对照组(p0.05),但在乙酸注射1hr时小鼠ACC内p-ERK1/2的表达又有明显增强,与对照组相比阳性细胞数明显增多(p0.05)。同时,Western selleck抑制剂 Blot结果还显示小鼠ACC内总ERK1/2在各时间点的表达实验组与对照组相比没有明显的差异(p>0.05)。 注射乙酸10mmin时小鼠前扣带回皮质内p-ERK1/2与GAD没有明显的共表达：免疫组织化学和Western Blot结果均显示在乙酸注射10min时小鼠ACC内p-ERK1/2的表达达到峰值,为了检测此时ACC内p-ERK1/2在何种细胞类型中表达,我们采用免疫荧光双标法检测了p-ERK1/2与GAD67(GABA能神经元标记物)的共表达情况。结果发现ACC内p-ERK1/2与GAD67没有明显的共存。 皮下注射MEK的抑制剂SL327不能有效减轻乙酸诱导的小鼠内脏疼痛反应,但能有效缓解小鼠痛相关的焦虑样行为：小鼠皮下给予SL327(30mg/kg)或同剂量的DMSO (SL327的溶剂),30分钟后再向两组小鼠腹腔给予0.6%的乙酸。免疫组织化学结果显示乙酸注射10min时实验组(SL327组)小鼠ACC内p-ERK1/2的免疫阳性细胞数与对照组(DMSO组)相比明显减少(p0.05)；高架十字迷宫结果显示乙酸注射2小时后SL327组小鼠在开放臂停留的时间百分比明显高于对照组,差异具有显著性(p<0.