8.将WT1启动子从5′端截短为不同长度(-1522bp、-1022bp、-522bp),并构建荧光素酶报告基因,培养OV、NC细胞,并分别共转染报告基因和TK质粒(内参),转染24小时后收取细胞,检测生物发光的量。9.用Ad-NR4A1-HA及Ad-GFP分别感染MIN6细胞48小时,按照ChIP试剂盒操作步骤进行实验,用HA点击此处抗体沉淀NR4A1,此时跟NR4A1结合的片段也被一起沉淀,设计引物,用PCR扩增WT1启动子中包含NR4A1结合位点的片段。研究结果1.在过表达NR4A1的细胞(OV细胞)中抗氧化分子GPX1、CAT、SOD1、WT1、ERG1在mRNA水平显著高于对照细胞(NC细胞),SOD2mRNA水平无明显变化PD98059临床试验;SOD1、WT1、Bcl-2的蛋白水平在OV细胞中显著高于对照细胞,SOD2、SIRT1蛋白水平无明显变化。通过查看WT1的启动子的序列,发现WT1启动子上有一个NR4A1的结合位点(-1118bpto-1111bp)。2.成功构建表达C-端带有HA标签(tag)的NR4A1腺病毒(Ad-NR4A1-MAPK Inhibitor Library clinical trialHA),感染MIN6细胞能够达到近100%的感染率。用上述腺病毒及对照病腺毒感染培养的MIN6细胞48小时后,Q-PCR结果显示感染Ad-NR4A1-HA的细胞NR4A1、WT1的mRNA表达量显著高于对照病毒感染的细胞;Western blot结果显示,感染Ad-NR4A1-HA的细胞中SOD1、Bcl-2、WT1的蛋白水平显著高于对照病毒感染的细胞,SOD2蛋白水平无明显变化。

3.应用RNA-Seq对化疗药物作用后的结肠癌细胞进行测序检测。4.应用Western Blotting、RT-PCR方法对RNA-seq结果进行验证,并检测转染ELF3si RNA及应用低剂量5-FU再次处理后的结肠癌细胞CD44分子表达变化。5.应用Western Blotting、MTT、克隆形成等实验检测姜黄素对CD44~+结肠GDC-0068体外癌细胞的抑制作用。结果生物信息学分析结果显示结肠癌组织中CD44分子表达水平显著高于癌旁正常组织,低剂量化疗药物处理结肠癌细胞一段时间后CD44表达水平明细升高,并且结肠癌细胞干性特征增强。RNA-Seq结果提示化疗药物处理可致结肠癌细胞中ETS转录因子家族成员之一的ELF3表达水平出现特异性增高,随后的RT-SHP099DMSO溶解度PCR以及Western blotting实验也证实了上述结果,在结肠癌细胞转染ELF3si RNA并应用低剂量化疗药物5-FU处理后,发现细胞的CD44表达水平降低。此外本研究发现姜黄素可抑制结肠癌细胞的增殖能力,对化学耐药性的结肠癌细胞也具有显著的抑制作用,姜黄素可抑制结肠癌细胞的克隆形成和迁移能力并减弱结Rigosertib购买肠癌细胞的干性特征,姜黄素还可降低结肠癌细胞表面CD44分子表达水平,对CD44~+结肠癌细胞具有特异性抑制作用。结论1.低剂量化疗药物处理可促进结肠癌细胞CD44分子表达水平升高。2.低剂量化疗药物处理可特异性上调ETS家族成员之一ELF3转录因子,ELF3与结肠癌细胞表面CD44分子表达水平升高相关。3.姜黄素对结肠癌细胞具有抑制作用,特别是对CD44~+结肠癌细胞具有显著抑制作用。

方法采用免疫组化和Western blot对手术切除的癌组织及对应的癌旁组织进行蛋白质水平检测;用Western blot方法分析各肝癌细胞系中Radil的表达,并利用敲低或过表达的方法分析Radil表达水平的变化对肝癌细胞生长、运动的影响。结果Radil在肝癌组织中表达均显著高于对应癌旁组织,高表达Radil可以促进肝癌细胞生长、迁移,而抑制凋亡相关分子的表达。结分子量论Radil在肝癌组织中高表达,可显著促进肝癌细胞的生长、迁移,有望为肝癌的治疗和预后判断提供参考。
目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、甲胎蛋白(AFP)指标与肝癌预后的相关性。方法选取原发性肝癌患者30例为肝癌组,并以同期健康查体者30例为对照组。比较两组NLR、PLR和血清AFP水平。肝癌也组患者均随访至2020年5月25日,统计其随访期间复发率和生存率等预后情况。比较不同预后患者入组时的NLR、PLR和血清AFP水平,并分析其NLR、PLR和血清AFP水平与预后的关系。结果与对照组比较,肝癌组NLR、PLR和血清AFP水平均升高(P<0.05)。肝癌组复发率和死亡率分别为20.00%和33.33%。肝癌组死亡患者入组时的NLStem Cell Compound LibraryR、PLR和血清AFP水平均高于其存活患者(P<0.05)。肝癌组复发患者入组时的NLR、PLR和血清AFP水平均高于其未复发患者(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,肝癌组NLR、PLR和血清AFP水平与复发率和死亡率均呈正相关(P<0.05)。结论 NLR、PLR和血清AFP水平与肝癌复发和生存预后均相关,可能作为其预后早期评估参考指标。
目的探讨彩色多普勒超声在肝癌与肝血管瘤鉴别诊断中的应用价值。

目的探讨X线在鉴别肺内结核结节与肿瘤结节的价值。方法回顾性分析2015年1月至2016年1月于宝鸡市中医医院放射科行X线检查的39例肺结核、81例肺肿瘤患者的病例资料,对肺结核和肺肿瘤患者的影像资料进行比对。结果结核结节病灶部位主要分布于肺上叶74.4%(29/39),肿瘤结节主要分布于肺部下叶59.3%(48/81),两组病灶部分分布对比差异有统计学意义(P<0.05)。Belinostat购买结核结节以边缘光滑(53.8%),内部溶解空洞(48.7%)、点状钙化(41.0%),周围卫星病灶(53.8%)为特征,肺肿瘤结节以边缘毛糙(44.4%)伴切迹(51.9%),内部空泡征(19.8%)、空气支气管征(25.9%),周围胸膜凹陷征(56.8%)为特征,两组在结节边缘、内部、周围特征对比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论X线能够显示结核购买A-1331852结节、肺内肿瘤结节的形态学特征,可以用于初步鉴别诊断。
目的分析合并抑郁症状的肺肿瘤术后过渡期患者社会人口学与疾病特征及其影响因素,为临床干预提供参考。方法连续收集2018年5—10月在西安市某三级甲等医院进行手术治疗的肺肿瘤患者213例,使用抑郁自评量表(SDS)评定抑郁症状,按照SDS评分将患者分为抑郁组和非抑郁组,进行组间比较分析,采用多因素lselleck化学药品ogistic回归分析合并抑郁的相关危险因素。结果肺肿瘤术后过渡期抑郁症状的发生率为52.1%,不同性别、医疗费别、有吸烟史、肿瘤类型、术后疼痛性质的患者抑郁症状的发生率差异有统计学意义(P<0.05),自费医疗(OR=3.908,95%CI1.893～8.071)、恶性肿瘤(OR=4.770,95%CI2.060～11.046)及术后持续疼痛(OR=4.051,95%CI1.972～8.322)与肺肿瘤术后过渡期抑郁症状显著相关。

结论槟榔碱可能通过损伤细胞膜而对L-02细胞产生毒性。
[目的]研究心脑舒通对缺氧/复氧损伤神经细胞的保护作用及其机制。[方法]体外培养Neuro-2a细胞,分为正常对照组、缺氧/复氧损伤模型组、心脑舒通(10、25、50 mg/L)给药组,建立缺氧缺糖(OGD)4 h/复氧无复糖(Rep)24 h损伤模型,检测心脑舒通对各组细胞增殖活力、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(△Ψm)的影响。[结果]与缺氧/复氧组比较,心脑舒通可以明显增加Neuro-2a细胞活力,减少LDH漏出,降低ROS水平,增强线selleck HPLC控制粒体膜电位。[结论]心脑舒通对缺氧/复氧损伤神经细胞具有明显保护作用,其机制与其影响活性氧水平和线粒体膜电位有关。
通过流式细胞仪进行检测,研究选择每种检测线粒体膜电位(Δψm)荧光染料的适用条件.选用罗丹明123、Di OC6(3)、TMRE、JCWnt 抑制剂-14种荧光染料,通过对紫外线诱导后细胞的线粒体膜电位进行检测,分析每种染料的检测条件.结果表明,罗丹明123检测到的Δψm变化较大,这可能与罗丹明123适用于检测细胞急性损伤中线粒体膜电位变化相关.通过比较实验方法,为将来采用流式细胞仪检测线粒体膜电位提供更准确的实验方法.
目的初步探讨脓毒症大鼠远期脑线粒体结构和功能损伤。

其中,(1)运用masSigPro和WGCNA对肝癌发生中6个病理阶段的基因表达谱数据进行时间序列分析发现,从肝脂肪肝到肝癌终末期转移过程中,基因表达变化最显著的是异型增生结节到肝癌早期阶段,也就是癌变开始发生时。(2)以细胞增殖为代表的brown_c56模块的基因在肝癌形成中的变化非常明显,所含基因在Alpelisib体内蛋白互作网络中形成一个核心区域。其次是brown_c12模块和red模块,已知肝疾病相关基因(包括肝硬化,肝异型增生,肝癌浸润和转移)主要集中到上述模块中。hub-bottlenecks基因集中分布于细胞增殖模块,提示肝癌的发生发展过程和细胞增殖的关系最为密切。(3)肿瘤阶段伴SB273005半抑制浓度随着脂肪酸β-氧化和三羧酸循环相关基因表达的降低,提示在肿瘤阶段细胞能量的供应方式发生了改变,这可能是因为肿瘤细胞的快速增殖需要快速的能量供应或快速增殖导致的氧气缺乏不得已而采取的能量获取方式。(4)通过对WGCNA得到的hub基因,基于所有已知肝疾病相关基因和DEGs之间的网VX-661络构建得到的hub-bottlenecks基因和关键模块所有基因与肝癌相关基因的功能相似性得分的分析,筛选得到肝癌发生中的关键基因有FYN、GYS2、CENPF、CCNB2、KIF4A、H2AFV、BUB1、H2AFZ、DCN、TOP2A、RRM2、HSP90AB1、XPO1并在肺鳞癌和胰腺癌中进行了验证。其作用机制是通过调控G2/M检查点来调控细胞周期。

目的侵袭和转移是影响肝癌患者预后生存的重要因素之一。肿瘤组织周围的微环境对肿瘤发生侵袭和转移起着不容忽视的重要作用,肿瘤相关成纤维细胞(CAF)在肝癌侵袭和转移中发挥重要作用。肝星状细胞(HSC)是肝脏主要的间质细胞之一,既往研究发现肝星状细胞与肝癌侵一般袭和转移密切相关。我们根据相关文献报道及既往实验发现,提出如下假设TGF-β1诱导肝星状细胞向肿瘤相关成纤维细胞转变,进一步促进肝细胞肝癌的侵袭和转移。本研究通过对人肝癌组织标本免疫组化检测,以及体外肝癌细胞与肝星状细胞共培养的实验模Selumetinib分子量型,验证肝癌微环境中HSC向CAF转化并促进肝癌侵袭和转移的现象,并探讨TGF-β1在其过程中的作用机制,研究结果将为探讨间质细胞在肝癌侵袭和转移中的作用提供帮助,为从微环境途径寻找HCC防治新靶点提供思路。方法收集临床肝癌手术患者组Eltanexor分子量织标本及病例随访资料;临床病理学观察肝癌手术标本中肝癌组织与正常组织中HSC与CAF的分布及密度;免疫组化检测TGF-β1、CAF标志分子(α-SMA、FAP)表达水平,分析TGF-β1与HSC、CAF的分布、密度及肝癌侵袭和转移的相关性,验证临床标本中TGF-β1通过诱导HSC向CAF转化促进肝癌侵袭和转移的现象。

结论耐多药/广泛耐药肺结核并发2型糖尿病患者以初治肺结核多见,是否并发糖尿病对耐多药/广泛耐药肺结核所耐药品数量、耐药谱均没有影响。对糖尿病等易感人群要加强防护,避免因感染耐药结核分枝杆菌而发生原发性耐药结核病。
目的了解杭州市糖尿病患者弓形虫感染情况。方法以2017年3月至2020年5月杭州市收治的337例临床试验1型糖尿病患者、624例2型糖尿病患者和384例妊娠糖尿病患者作为调查对象,按11的比例分别选择同期年龄和性别相匹配的健康体检者及无妊娠糖尿病孕妇作为对照。采用酶联免疫吸附试验检测糖尿病患者和对照者血清抗弓形虫IgG和IgM抗体,比较糖尿病患者及相应对照血清抗体阳性率差异。结果杭州市1型糖3-Methyladenine花费尿病患者血清抗弓形虫抗体总体阳性率(18.10% vs.4.45%,χ~2=31.38,P <0.01)和 IgG抗体阳性率(14.54% vs.2.97%,χ~2=28.28,P <0.01)均显著高于健康对照,但两者抗弓形虫IgM抗体阳性率差异无统计学意义(3.56% vs.1.48%时间,χ~2=2.96,P> 0.05)。2型糖尿病患者血清抗弓形虫抗体总体阳性率(23.56% vs.6.57%,χ~2=70.37,P <0.01)和IgG抗体阳性率(21.15% vs.5.45%,χ~2=66.73,P <0.01)均显著高于健康对照,但两者抗弓形虫IgM抗体阳性率差异无统计学意义(2.40% vs.1.12%,χ~2=2.96,P> 0.05)。