(2)应用PD-1靶向阻断策略(PD-1单抗及PD-1基因敲减CD19 CAR-T细胞)治疗R/R DLBCL患者,观察疗效和毒副反应情况;并应用外显子基因捕获二代测序、寡核苷酸阵列芯片和免疫组化技术对患者淋巴结组织进行检测,以探寻PD-1靶向治疗相关的预测生物标记物;应用流式细胞仪监测患者治疗前后外周血购买VX-661T细胞表达PD-1和TIM-3的动态变化,以进一步探究PD-1靶向治疗耐药与耗竭T细胞可能的相关机制。(3)建立BALB/c小鼠A20细胞淋巴瘤皮下模型,观察肿瘤成瘤率及生长速度;分别应用阻断性PD-1单抗单药和PD-1单抗+TIM-3单抗联合方案治疗成瘤小鼠,观察各组治疗效果和selleck生存情况;并应用CD8+磁珠分选、流式细胞仪、ELISA、CCK8等方法进一步探究PD-1+TIM-3单抗联合方案治疗的免疫学机制。研究结果(1)与正常对照组相比,初诊DLBCL患者外周血CD4+T细胞占CD3+T细胞的比例明显下降(45.47±10.07%VS.61.91±10通常.52%,P=0.036),而CD8+T细胞比例则相应升高(43.99±9.32%VS.31.94±6.50%,P=0.045),且CD4+T细胞及CD8+T细胞表达PD-1水平均明显上调(CD4+PD-1+16.30±4.58%VS.8.96±2.95%,P=0.017;CD8+PD-1+18.12±5.43%VS.10.13±3.30,P=0.023)。

由于淋巴瘤病理类型复杂,治疗原则各有不同,为进一步提高淋巴瘤诊疗能力和规范化水平,配合抗肿瘤药品供应保障有关政策调整,保障医疗质量与安全,现对《中国恶性淋巴瘤诊疗规范(2015年版)》进行修订和更新。
目的拟根据淋巴瘤疾病特异性症状及各种治疗反应,编制适用于淋巴瘤患者的症状评估量表,并检验其信效度。方法在查阅文献、半结构式访谈及现有的癌症患者多症状评Danusertib MW估工具基础上总结淋巴瘤患者症状条目池;通过两轮专家函询,形成淋巴瘤患者症状评估表。采用淋巴瘤患者症状评估表及M.D.安德森症状评估量表对150例治疗前、治疗中的患者进行评估,检验其量表的信效度。结果淋巴瘤患者症状评估量表包括23个条目,各症状条目的 I-CVI在0.750-1.000之间,量表内容效度的S-CVI/Ave为0.90Raf 抑制剂0;探索性因子分析提取6个公因子,其方差累积贡献率为69.63%,分别将其命名为胃肠道反应、其它副作用、疾病全身症状、情绪-睡眠、疼痛相关症状、皮肤反应6个维度;以MDASI-PartII作为效标工具,淋巴瘤患者症状评估量表总分与MDASI-Partll总分相关系数r为0.688,P<0.001。总量表的Cronbach’sα系数JIB 04为0.812,6个公因子Cronbach’sα系数0.770-0.899。结论此次研究形成的淋巴瘤患者症状评估表具有较好的信效度,适用于淋巴瘤患者症状的测评。
目的回顾性分析32例淋巴瘤胃部浸润患者全身~(18)F-FDG PET/CT检查结果,探讨淋巴瘤胃部浸润~(18)F-FDG PET/CT显像特点及全身~(18)F-FDG PET/CT检查在淋巴瘤胃部浸润诊断、分期、再分期和疗效评价中的价值。

采用生化方法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD),共聚焦显微镜检测活性氧(ROS)和线粒体膜电位,免疫荧光检测CYP2E1蛋白,Western blot检测总ERK1/2蛋白水平和磷酸化水平。结果经过低、中、高剂量乙醇处理后,LDH活力分别较对照组升高,SOD活力下降。与中剂量组比较,RXDX-101订单加入低、中、高剂量二丙烯基硫醚抑制剂,LDH活力降低,且SOD活力升高;合用低、中、高剂量硫普罗宁后,LDH活力分别降低,且SOD活力升高。与对照组相比,经过低、中、高剂量的二丙烯基硫醚和硫普罗宁单独处理,细胞培养基LDH活力和SOD活力均没有变化(P>0.05)。低、中、AG-120供应商高剂量乙醇处理组CYP2E1蛋白水平较对照组升高,0.2 mmol/L硫普罗宁合用400 mmol/L乙醇降低CYP2E1的表达7%(P<0.01)。经过低、中、高剂量乙醇处理后,ROS生成量较对照组升高。与乙醇(400 mmol/L)组比较,加入低、中、高剂量二丙烯基硫醚Metabolism抑制剂抑制剂后,ROS含量下降;加入低、中、高剂量硫普罗宁,ROS含量下降。经过低、中、高剂量乙醇处理后,线粒体膜电位荧光强度较对照组升高。与乙醇(400 mmol/L)组比较,加入低、中、高剂量二丙烯基硫醚抑制剂后,线粒体膜电位荧光降低;加入低、中、高剂量硫普罗宁,线粒体膜电位荧光降低。低、中、高剂量乙醇处理组ERK蛋白总量不变,p-ERK蛋白表达下降。

2.SLP-2抑制对SW620细胞β-catenin及其上、下游信号通路分子蛋白表达水平的影响Western-blot结果显示SLP-2-siRNAs转染48h后,β-catenin上游分子GSK3β的蛋白表达及其磷酸化水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而β-catenin及其下游分子Survivin、cyclin D1和c-Myc的蛋白表达水平明显selleck抑制剂降低(P<0.05)。结论SLP-2通过影响β-catenin信号通路,影响结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
前言在全球范围内结肠癌(Colorectal cancer,CRC)是第三大常见的肿瘤,近10年来虽然针对结肠癌患者的治疗方式有一定的进步,并且患者的生存质量有一定的改善,但是结肠癌患者的临床预后仍较差,其中结肠癌发生转selleck合成移是导致患者高死亡率的主要原因。寻找可靠敏感的诊断分子标志物和药物治疗靶标,实现结肠癌的早期诊断和早期治疗,提高结肠癌患者的生存率,成为结肠癌研究中的重要目标。结肠癌发病的分子机制具有异质性。过去的10年里,人们做出了重大的努力来开发“靶向治疗”或“生物治疗”,这些药物通过影响肿瘤生长的特定细胞信号通路发挥作用。表皮生长因子受体(EGFRPX-478研究购买)是具有酪氨酸激酶活性的细胞表面受体,高达80%的结肠癌患者中EGFR基因表达上调,并与结肠癌转移风险相关。microRNAs(miRNA)是长度为19-23个核苷酸的小的内源性非编码RNA,通过靶向mRNA的3’非翻译区(UTR)调控基因表达。miRNAs在各种生物过程中起着基础性的作用。本实验利用基因芯片的方法发现miR-320d在人EGFR高表达结肠癌组织里表达下调,提示miR-320d可能与结肠癌的发生发展有关。

一、研究背景胰腺癌是一种致死率极高的消化道恶性疾病,发病早期肿瘤细胞即发生局部侵袭与远处转移。胰腺癌的主要临床病理特征之一就是肿瘤细胞周围存在着大量的纤维组织以及丰富的细胞外基质成分(extracellular matrix,ECM)。这些特殊的ECM成分能够通过激活肿瘤细胞表面Selleckchem LY2603618整合素Integrin及其胞内信号分子的相互作用调控胰腺癌的侵袭与转移。因而,深入理解胰腺癌中Integrin及其胞内信号分子之间的这种相互调控作用能够为理解胰腺癌的转移提供新的理论依据。选择性剪接修饰是基因转录后调控的一种重要的分子机制。其异常变化往往会导致肿不瘤的发生与发展。因而,解析肿瘤细胞中基因选择性剪接的分子调控机制能够为肿瘤的临床诊治提供潜在的干预靶点。前期研究发现非受体酪氨酸激酶Fyn及Integrinβ1在胰腺癌的转移过程中发挥了十分重要的作用。抑制Fyn的活性能够上调胰腺癌细胞中核内不均一蛋白hnRNP临床试验 E1以及integrinβ1C剪接体的的表达。由于hn RNP E1具有调控基因选择性剪接的功能,因而我们推测胰腺癌中Fyn的活性能够通过影响hnRNP E1的表达与功能从而调控integrinβ1基因的选择性剪接,并最终影响胰腺癌的转移。本课题主要研究胰腺癌中hnRNP E1剪接子功能复合物调控integrinβ1基因选择性剪接的分子机制。

3.初步确定抗氧化应激基因中与LINC13相关性最高的基因,结合GEPIA网站分析SM1与肝癌患者OS及DFS关系;同时应用RT-PCR检测153例肝癌组织SM1水平,分析SM1水平对接受OXA化疗的82例HCC患者及71例接受不含OXA化疗方案的患者PFS的影响;4.提取OXA-S和OXA-R的SRT2104半抑制浓度HepG2细胞总RNA及总蛋白,检测SM1转录及蛋白水平;免疫组织化学染色法检测10例OXA-S及10例OXA-R肝癌组织SM1的表达水平。5.提取LO2、HepG2、HCC-LM3、Hu H-7、Hep3B、MHCC97H细胞总RNA及总蛋白,分别检测LINC13转录水Selleck Liproxstatin-1平及SM1蛋白水平并进行相关性分析;分析SM1与肝癌OXA耐药的关系。6.分子克隆技术构建LINC13及SM1重组质粒,通过细胞转染、RT-PCR、western blot分析LINC13对SM1靶向调控作用。CCK-8法检测HepG2、MHCC97H细胞在不同浓度OXABTK inhibitor作用下的存活率,确定IC50。结果1.OXA耐药相关通路及LINC13与可能耐药通路之间的关系根据RNA-Seq数据分析OXA耐药相关信号通路,发现抗氧化应激通路是OXA耐药相关基因主要富集的通路之一,且GSEA分析发现LINC13与抗氧化应激相关基因富集量正相关(P=0.006)。流式细胞术证实OXA耐药细胞较敏感细胞ROS水平低(P<0.01)。

结论 miR-200C在胃癌患者血清中的表达水平呈下降趋势;血清miR-200C水平与患者淋巴结转移及TNM分期有关;血清miR-200C作为胃癌诊断标志物具有较高灵敏度及特异度,单独或与CEA、CA-199和CA-724联合检测对胃癌诊断具Selleck ITF2357有重要价值。
目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白(Tim)-3在胃癌患者CD4~+T细胞中的表达及其对胃癌进展的调控机制。方法前瞻性选择107例胃癌患者,收集其手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织,采用流式细胞术检测胃https://www.selleck.cn/products/kpt-330.html癌组织及癌旁正常组织CD4~+T细胞中Tim-3表达水平。将胃癌AGS细胞分为空白对照组、阴性对照组、Tim-3过表达组,空白对照组不作任何处理,阴性对照组转染10μg pEGFP-N1质粒,Tim-3过表达组转染1GDC-0994生产商0μg pEGFP-N1-Tim-3质粒,采用CCK-8法检测各组胃癌AGS细胞增殖能力,采用Transwell小室侵袭实验检测各组胃癌AGS细胞侵袭能力,采用Western印迹检测各组胃癌AGS细胞中Tim-3、无翅型MMTV整合位点家族成员(Wnt)3、β-连环素(β-catenin)表达水平。

第四部分 ASIC1a蛋白通过激活自噬信号通路介导胃癌细胞侵袭与转移的机制研究目的探讨ASIC1a通过激活自噬信号通路介导胃癌细胞侵袭与转移。方法以体外培养的人AGS胃癌细胞为研究对象,通过pH6.0酸性培养液诱导细胞损伤,通过单细胞膜片钳技术检测AGS细胞上的电流,免疫沉淀法检测自噬标志性蛋白LC3-II的表达及与ASIC1Sellecka蛋白的共定位情况。结果单细胞膜片钳技术检测AGS细胞上有功能的电流产生,且可被ASIC1a的阻断剂阻断,免疫沉淀技术显示ASIC1a蛋白与LC3-II有共定位现象。结论组织酸化等肿瘤诱发因素导致了胃癌细胞AGS细胞上ASIC1a的异常激活,并通过调节自噬信号通路的活性介导胃癌细胞侵袭与转移。
并且目的分析常熟市第一人民医院309例胃癌手术患者的临床病理特征。方法回顾性分析309例手术患者的临床资料。患者分为年龄≤40岁组、41～65岁组和>65岁组,分析肿瘤部位、病理类型、临床分期和脉管神经侵犯。结果该组胃癌高发年龄≥41岁,男性比例高于女性。肿瘤多见于胃体、胃窦部(79.29%)。肿瘤以BoA-1331852体内rrmanII型多见(51.13%),病理类型以腺癌为主(91.13%)。肿瘤分化程度以低-未分化型为主(62.14%)。胃癌浸润深度以T4期主(72.49%)。淋巴结转移以N3期为主(32.04%)。TNM分期以Ⅲ期为主(48.87%)。在所有胃癌患者中,早期胃癌所占比例低于进展期胃癌。结论胃癌高发于中老年岁男性。早期胃癌患者比例低,确诊患者多为胃癌中晚期,胃癌早期诊断率有待提高。

通过生物信息学网站确定AK126420基因学特征,明确其染色体定位和具体编码蛋白的能力。应用RNA核质分离实验和原位杂交技术确定AK126420的细胞定位。通过荧光素酶实验确定AK126420的核心启动子区,使用软件预测可能与AK126420核心启动子区结合的转录因子,并经实时定量PCR、荧光素酶实验及染色质免疫共沉淀实验(ChIP实验)验证转录因子对AK12642MS-275细胞系0的调节作用。在体外细胞水平采用细胞迁移、浸润、增殖、凋亡实验检测AK126420对胃癌细胞生物学行为的影响。在裸鼠体内,通过皮下成瘤和尾静脉注射实验研究AK126420对胃癌生长和转移能力的影响。通过RNA pull down、质谱分析以及RNA免疫共沉淀实验(RIP实验)鉴定AK126420可与HNRNPH1蛋白结合。使用实时定量PCR确认细节、Western blot及RNA免疫共沉淀实验鉴定AK126420/HNRNPH1蛋白复合体调节的靶基因及参与的下游信号通路。结果(1)lncRNAAK126420在淋巴结出现转移的胃癌组织中表达上调通过lncRNA芯片高通量筛选,发现在发生和不发生淋巴结转移的两类原发性胃癌组织中存在1057个差异表达的lncRNAs,对芯片数据进一步分CP-690550分子量析筛选出与胃癌转移显著相关的lncRNAAK126420进行深入研究。实时定量PCR结果表明,出现淋巴结转移的胃癌患者组织中AK126420上调。临床病理参数及诊断预后相关性分析显示AK126420高表达与发生淋巴结转移、远处转移及较差的预后呈正相关,并且其表达可用来鉴别胃癌组织是否存在淋巴结转移。UCSC和NCBI网站检索结果显示,AK126420位于人的11号染色体上,由3个外显子构成,全长包含3019个核苷酸。

第二部分检测高糖诱导人视网膜内皮细胞炎性凋亡机制1、透射电镜高糖培养下的视网膜内皮细胞出现明显的凋亡形态学变化,表现为线粒体中的空泡化,染色质浓缩和内质网的脱颗粒,而在高糖+抑制剂组上述变化显著减轻;2、Western-blot检测凋亡相关蛋白表达应用pifithrin-α抑制p53蛋白表达后,促凋亡蛋白Bax、Cl-caspase-3表达Pim抑制剂减少,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达升高;3、Western-blot检测p53和NF-κB通路蛋白在高糖培养下的RECs细胞,p53、p-p53、p65、p-p65、IκB、p-IκB表达量均有不同程度升高,pifithrin-α抑制p53蛋白表达后,p53表达量显著降低,p-p53/p53比值显著升高,且NF-κBVS-6063通路蛋白p65、IκB表达量显著降低,p-p65/p65和p-IκB/IκB比值显著降低。4、免疫荧光检测p53和NF-κB p65蛋白表达共定位高糖组,p53、p65荧光信号呈现强阳性,较正常对照组显著增强,抑制p53蛋白后高糖培养下的RECs细胞p53、p65荧光信号显著降低,以p53蛋白荧光信号降低明显,在细VX-661价格胞核及细胞质内仍可观察到p65荧光信号。5、q-PCR检测p53、p65 mRNA转录水平高糖组p53、p65的mRNA表达显著升高;抑制p53蛋白后高糖培养下的RECs细胞p53和p65的mRNA表达水平明显降低。结论高浓度葡萄糖可以对视网膜内皮细胞造成实质性损伤,早期即导致其形态学改变;高浓度葡萄糖可激活视网膜内皮细胞凋亡通路和炎症反应通路,导致视网膜内皮细胞凋亡率上升、炎症因子表达增加。