05)。结论:本研究中提供的实验证据表明,ZFP580可以作为缺氧环境下的新型调节分子。我们证实,ZFP580通过抑制线粒体凋亡途径在TGF-β1介导的抗化学缺氧诱导的细胞损伤中发挥重要的抗凋亡保护作用。
目的:调控血管平滑肌(VSMC)表型转换是防治PCI术后再狭窄的新策略,micro RNA作为VSMC表型转换的调节因子,可通过转录后水平调控下游靶基因的的表达从而影响VSMC的表型转换。本组首先克隆的C2H2型锌指核转录因子ZFP580可调控内皮细胞及VSMC的增殖及迁移而影响血管重塑。本组新近实验证明:micro

RNA-206既可靶向调控ZFP580的表达,又可促进VSMC从收缩型向合成型转换。本实验拟采用micro RNA-up与micro RNA-down技术,观察micro RNA-206表达水平的变化对大鼠VSMC分化功能的影响,并验证其可能的分子机制。方法:提取分离大鼠VSMC,通过形态学观察及免疫组化法进行鉴定。生物信息学分析ZFP580与mi R-206的结合位点。利用TGF-β(根据文献参考选取2ng/ml)对大鼠VSMC进行不同时间点刺激,对照组选用等量的DMEM。Realtime-PCR测定mi R-206的表达水平;Western-blot检测ZFP580、SMa-actin、SM22a、Smad2/3、phospho-Smad2/3的表达水平;使用慢病毒过表达或低表达mi R-206、慢病毒过表达或低表达ZFP580和应用SB431542抑制剂后检测相关指标;荧光素酶报告实验(Luciferase)检测mi R-206与ZFP580 3‘UTR的结合作用。结果:(1)在大鼠VSMC加入适宜的TGF-β(根据文献参考选取2ng/ml)进行预处理,分别刺激大鼠VSMC 6h、12h、24h、48h,对照组中加入等量的DMEM。利用Realtime-PCR测定mi R-206的表达水平,结果发现在12h的时候mi 购买DAPT secretase R-206的水平降至最低点,与对照组相比具有统计学差异(P<0.05)。Western-blot检测ZFP580的表达水平,结果显示同样在12h时ZFP580的表达水平达到最高,与对照组相比具有统计学差异(P<0.05)。与此同时,Western-blot检测SMa-actin、SM22a的表达水平结果显示:SMa-actin、SM22a的表达较对照组相比均不同程度的降低(P<0.05)。(7)过表达或低表达ZFP580慢病毒感染大鼠VSMC72h后。Western-blot检测ZFP580的表达水平,结果显示:高表达ZFP580感染组与对照组相比,SMa-actin与SM22a的表达水平上调(P<0.05),低表达ZFP580感染组与对照组相比,SMa-actin、SM22a的表达水平显著上升(P
目的TGFβ1即转化生长因子beta1是一种小分子蛋白因子,有报道显示TGFβ1在炎症局部组织中分泌量显著增加,并在局部组织的伤口愈合以及促使纤维化过程中扮演着重要角色。然而,TGFβ1在外周伤害性感觉传递过程中所起的作用尚不太清楚。本研究旨在探讨TGFβ1对外周初级感觉神经元兴奋性的急性作用及其在慢性胰腺炎大鼠的痛觉过敏中扮演的角色。方法1.在180-200

g雄性SD大鼠胰管内注射三硝基苯磺酸(TNBS)诱导慢性胰腺炎(CP)模型。2.胰腺壁注射荧光素(Dil)逆行标记胰腺特异性背根神经节(DRG)神经元。运用全细胞膜片钳方法研究TGFβ1对胰腺相关DRG神经元膜电位和兴奋性的作用。3.运用钙成像方法研究TGFβ1对胰腺相关DRG神经元胞内钙离子浓度的影响。4.运用Western AP24534 selleckchem Blotting检测TGFβ1及其受体在大鼠胰腺和胰腺相关节段DRG(T9-T13)中的表达水平。5.运用Von frey filament(VFF)评测正常大鼠或CP大鼠在注射药物前后痛行为反应。结果1.全细胞膜片钳记录显示,灌流TGFβ1引起胰腺特异性DRG神经元细胞膜去极化并进一步诱发动作电位,升高神经元兴奋性;与对照组比较,灌流TGFβ1使CP大鼠胰腺相关DRG神经元去极化及放电更加显著。2.钙成像结果显示,灌流TGFβ1可使正常大鼠胰腺相关DRG神经元胞内钙离子浓度上升;与对照组比较,灌流TGFβ1使CP大鼠胰腺相关DRG神经元胞内钙离子浓度上升更加显著。3.与对照组比较,CP大鼠胰腺中TGFβ1及其前体表达水平显著升高,胰腺相关DRG中的TGFβ1及其前体,TGFβI型和II型受体表达水平显著升高。4.鞘内注射TGFβ1诱发正常大鼠产生腹部痛觉过敏;鞘内注射TGFβ受体拮抗剂SB431542明显缓解CP大鼠的痛觉过敏。结论我们的研究提示TGFβ1对初级感觉神经元有急性的兴奋作用,在慢性胰腺炎大鼠外周神经系统中激活的TGFβ1/TGFβ受体信号通路参与介导慢性胰腺炎的痛觉过敏。这些结果以及后续的研究将有助于发现慢性胰腺炎疼痛治疗的新靶标。
目的:前期研究证实,补肾法、疏肝法具有提高体外受精-胚胎移植(in

vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)患者临床妊娠率、改善妊娠结局、提高卵母细胞质量的作用,本研究拟通过观察补肾法、疏肝法对IVF-ET患者体外培养卵巢壁颗粒细胞ACTA及其信号通路的调控作用,以探讨两法促进卵泡发育、提高卵母细胞质量作用机制及其途经的异同。方法:1含药血清制备补肾调经方、逍遥散方含药血清:选取年龄在20-30岁,身体健康,月经规律,B超显示有成熟卵泡,且无卵巢、子宫器质性疾病的女性志愿者10名,分别服用补肾调经方和逍遥散方。补肾调经方、逍遥散方服用方法是每日1剂,300ml,早晚分服。补肾调经方和逍遥散方连续服药3天,第4天清晨空腹服用全天剂量药物(服药前禁食12h),于末次服药1h后静脉取血5ml,室温静置2h,3000r/min离心10min,取上清,56℃水浴30 min灭活补体,0.

大量研究表明,除刺激胰岛素分泌外,GLP-1可通过促进胰岛β细胞增殖,抑制β细胞凋亡,从而增加胰岛β细胞量.本文就其相关分子信号转导机制进行综述.
目的:探讨电针”内关”穴对心肌肥厚模型大鼠一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响。方法:SD大鼠50只随机数字表法分为正常组、模型组、电针组、p38抑制剂组、电针+p38抑制剂组,采用皮下注射盐酸异丙肾上腺素3

mg/(kg.d)建立心肌肥厚大鼠模型,电针组采用连续波,频率2 Hz,强度1 mA,通电20 min,1次/d,p38抑制剂组在造模基础上0.3 mg/(kg.d)SB203580皮下注射,共14 d,电针+p38抑制剂组在造模基础上同时应用抑制剂和电针,大鼠于第15 d测量左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径、心肌纤维横径,硝酸还原酶法测定血清和心肌组织NO含量,并对数据进行统计分析。结果:模型组大鼠左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径、心肌纤维横径于造模后升高,心肌组织和血清NO含量造模后降低,和正常组比较,有非常显著性差异(P<0.01);经电针和抑制剂治疗后大鼠左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径、心肌纤维横径均明显低于模型组,NO均明显高于模型组,和模型组比较有显著性差异(P<0.05,P0.05)。结论:电针"内关"可以明显抑制心肌肥厚,其抗心肌肥厚作用可能是通过升高NO来实现的。
心脏重构是一种常见的病理生理状态,包括心肌肥厚及间质纤维化,是各种心血管疾病发展为慢性心功能不全、心力衰竭的重要环节,由多种体内外刺激因素通过启动细胞内共同信号转导通路而促发/激活。有研究表明,p38丝裂原蛋白活化激酶(MAPK)激活参与心脏重构并在其中起着重要作用,用特异性抑制剂阻断该信号通路可明显减轻心脏重构。该文就p38MAPK对心脏重构重要环节影响的研究进展予以综述。
目的探讨地塞米松对海水淹溺性肺水肿的保护作用及其分子机制。方法采用气管内滴注海水的方法复制海水淹溺性肺损伤的大鼠模型,测定肺水肿的指标及肺组织中claudin-4、核转录因子-κB(NF-κB)、p38蛋白水平的表达;培养A549细胞,分别应用NF-κB抑制剂、p38抑制剂、糖皮质激素受体(GR)阻断剂(RU486)研究地塞米松改善海水淹溺性肺水肿的分子机制。结果吸入海水后肺水肿形成,海水可活化NF-κB及p38,同时下调claudin-4,地塞米松可缓解上述改变;应用PDC抑制NF-κB活化,并采用SB203580抑制p38活化可缓解海水诱导的claudin-4下调和单层细胞通透性的增高,应用RU486阻断GR后,地塞米松上调claudin-4的作用则大大降低。结论地塞米松可抑制海水诱导的NF-κB活化,缓解NF-κB活化介导的claudin-4表达下调及肺通透性增高,从而减轻海水淹溺性肺水肿。
缺血/再灌注损伤(IRI)是体外循环心内直视手术常见的并发症,甚至是导致死亡的主要原因,其确切机制目前尚未明了,胰岛素抵抗可能是其发生机制之一,而心肌胰岛素抵抗的产生与葡萄糖转运蛋白4的表达降低和转位异常有密切关系。p38MAPK作为分裂原激活的蛋白激酶家族的一员,在许多生物效应中发挥着重要的作用,与缺血/再灌注损伤、胰岛素抵抗、葡萄糖转运等有着密切关系,p38MAPK可能参与缺血/再灌注损伤心肌胰岛素抵抗的过程。
目的:探索Fas通路在结肠癌细胞中诱导上皮间质转化(epithelial-mesenchymal

那个 那个 transition,EMT)的分子机制。方法:分别对结肠癌细胞SW480及DLD1予以低剂量FasL(12.5 ng/mL)处理。作用3d后分别提取实验组和对照组细胞的总蛋白、总RNA,并进行Western blot、RT-PCR检测,分析FasL作用下结肠癌细胞的上皮标记物、间质标记物以及EMT相关的转录因子的表达状况。在低剂量FasL作用3d后行免疫荧光检测,观察EMT相关转录因子在细胞内的分布情况。建立稳定敲除Snail及Twist的结肠癌细胞系,再予以低剂量FasL刺激,采用Western

blot、RT-PCR检测是否发生EMT过程。对结肠癌细胞SW480予以低剂量FasL(12.5 ng/mL)处理后,通过Western 点击此处 blot检测实验组和对照组细胞ERK1/2通路及p38通路的激活状况。对SW480细胞进行信号通路抑制剂的预处理,再予以低剂量FasL刺激,采用Western blot、RT-PCR检测是否发生EMT过程,从而探索Fas通路诱导EMT的可能机制。结果:低剂量FasL可使结肠癌SW480和DLD1细胞的上皮标记物表达下调,间质标记物表达上调,EMT相关转录因子在细胞核周聚集,细胞发生梭形改变,提示发生EMT。而将结肠癌细胞的Snail或Twist基因敲除后,FasL的上述诱导作用明显减弱。低剂量FasL可激活结肠癌细胞的ERK1/2通路激活,而ERK抑制剂可减弱FasL诱导的EMT过程。结论:Fas通路可能通过激活ERK1/2通路诱导结肠癌细胞发生EMT。
20130644蛋白激酶B和丝裂原活化蛋白激酶在烟酸保护的HaCaT细胞抵抗中波紫外线损伤中的作用/林福全(杭州市第三医院皮肤科),许文,关翠萍…∥中华皮肤科杂志.-2012,11(45).-806～810检测烟酸对UVB照射后角质形成细胞株HaCaT细胞死亡及凋亡的影响,观察烟酸单独或者联合UVB
放射性肺纤维化是放疗常见的并发症,是效应细胞受到射线照射后的综合反应,以渗出性炎症起病,最终肺成纤维细胞增生。肺成纤维细胞是肺纤维化的主要效应细胞,经放射线刺激后的成纤维细胞过度增殖,凋亡受阻,细胞周期也随之改变。同时,成纤维细胞分泌的转化生长因子β增加,而活化后的转化生长因子β又进一步刺激肺成纤维细胞,促进其增殖。同时一些细胞因子及蛋白进一步刺激成纤维细胞,导致胶原大量沉积,肺泡塌陷及肺间质纤维化。该文主要介绍近年射线对成肺成纤维细胞影响的研究情况。
目的探讨α硫辛酸对高糖环境下心肌成纤维细胞(CFb)中胶原生成的影响及作用机制。方法将原代培养乳鼠CFb按培养液不同分组:正常糖组(NG,5.5mmol/L葡萄糖);高糖组(高糖,25.

Functional genomics has helped

us identify a catalog of genetic and epigenetic alterations that may be exploited as potential therapeutic targets and biomarkers of response. New treatment combinations targeting ER and such oncogenic signaling pathways which block the crosstalk between these pathways have been proven effective in preclinical models. Results of recent clinical studies suggest that subsets of patients benefit from the combination of inhibitor targeting certain oncogenic signaling pathway with endocrine therapy. Especially, inhibition of the GDC-0449化学结构 m TOR signaling pathway, a key component implicated http://www.selleck.cn/products/tenofovir-alafenamide-gs-7340.html in mediating multiple signaling cascades, offers a promising approach to restore sensitivity to endocrine therapy in breast

cancer. We systematically reviewed important publications cited in Pub Med, recent abstracts from ASCO annual meetings and San Antonio Breast Cancer Symposium, and relevant trials registered at Clinical Trials.gov. We present the molecular mechanisms contributing to endocrine resistance, in particular focusing on the biological rationale for the clinical development of novel targeted agents in endocrine resistant breast cancer. We summarize clinical trials utilizing novel strategies to overcome therapeutic resistance, highlighting the need to better identify the appropriate patients whose diseases are most likely to benefit from these specific strategies.
目前,我国原发性肝癌(primary

liver cancer,P L C)的治疗形势十分严峻,其从根本上取决于对PLC发病机制的系统认识.近年来,随着相关分子机制,诸如信号转导通路的不断阐明,PLC的治疗正面临新的机遇和挑战.分子靶向药物(molecular targeted agents),包括酪氨酸激酶抑制剂和单克隆抗体等,正是基于这些理论前提才得以出现和得到迅猛发展.他已逐渐成为PLC治疗的新宠,也代表了未来的发展方向.本文就新近出现的分子机制研究及靶向药物的特点及趋势作一综述.可以预见,分子机制研究的突破会创造更为有效的靶向药物,配合规范的综合治疗,最终可使PLC的治疗获得新成功.
Cutaneous malignant melanoma is the most aggressive form of skin cancer with an extremely poor survival rate for the patients diagnosed with locally 很少 invasive and metastatic disease states. Intensive research has led in last few years to an improvement of the early detection and curative treatment of primary cutaneous melanomas that are confined to the skin by tumor surgical resection. However, locally advanced and disseminated melanomas are generally resistant to conventional treatments, including ionizing radiation, systemic chemotherapy, immunotherapy and/or adjuvant stem cellbased therapies, and result in the death of patients.

05);血中淀粉酶、内毒素水平也显著降低(p 结论: 重症急性胰腺炎肺损伤时,P38MAPK活化,将炎症信号传递给核转录因子NF-kappaB,使之活化,增加了TNF-а、NO等多种炎症因子的转录,以及ICAM-1的大量表达,使炎症因子大量释放入血。同时在胰腺炎发生发展过程中血中内毒素,淀粉酶水平明显升高。抑制剂SB203580能特异性抑制肺组织中P38MAPK的活化,明显减少炎症因子的产生,进而减轻肺组织的炎症损伤。中药清胰汤组肺组织P38MAPK的活性较模型组明显降低,接近于抑制剂组,略高于假手术组。其血中炎症因子水平以及肺组织中炎症介质(介导炎症细胞局部反应的ICAM-1等)也与抑制剂组相仿。从而说明,中药在治疗重症急性胰腺炎肺损伤时可以通过下调P38MAPK活性等环节影响多种炎症介质的产生,进而起到保护肺组织的积极作用。中西药物在急性胰腺炎肺损伤发病的不同环节中,发挥着十分重要的作用,且各有所长,因此,在重症急性胰腺炎肺损伤的治疗过程中应该遵循:内外结合、中西并用、辨证施治、标本兼治。
目的：研究周期性应变条件下VSMC的力学信号转导径路，探讨周期性应变导致血管平滑肌细胞增殖的机制。

mTOR抑制剂 材料与方法：利用脉动膜式张应力系统，给离体培养的成年SD大鼠胸主动脉SMC施加周期性应变。①观察周期性应变条件下VSMC形态、细胞增殖及DNA合成的变化；②考马斯亮蓝染色观察微丝空间结构的变化，免疫荧光细胞化学及激光共聚焦技术检测细胞骨架蛋白中踝蛋白、桩蛋白的表达变化，免疫细胞化学检测踝蛋白、桩蛋白的磷酸化情况；③RGD阻断细胞外基质与整合素的结合，观察VSMC的增殖、踝蛋白、桩蛋白的磷酸化以及微丝空间结构变化：Genistein和Cytochalasin B分别阻断细胞骨架蛋白的磷酸化与细胞骨架装配观察VSMC的增殖情况。 结果：①8％的周期性应变抑制VSMC生长和DNA合成；14％的周期性应变明显促进VSMC增殖和DNA的合成，24h和48h其DNA合成分别是对照组的1.4和1.8倍。②14％的周期应变条件下，细胞发生与应力加载方向垂直的重排。VSMC发生明显的形变，形态指数减小，铺展面积、周长和长轴在加载0-6小时增加，12-24小时减小并趋于稳定。同时微丝减少，排列紊乱，向细胞膜侧靠近，踝蛋白和桩蛋白的表达增加，发生快速磷酸化。③RGD能抑制14％周期性应变作用下的VSMC增殖，踝蛋白、桩蛋白的磷酸化和微丝重组。Cytochalasin

selleck抑制剂 B及Genistein能阻断周期性应变作用下的VSMC增殖。 结论：细胞外基质—整合素—细胞骨架蛋白—细胞骨架径路是周期性应变条件下VSMC增殖的重要信号转导途径。
目的 探讨MAPK中ERK、JNK、P38三条通路在骨肉瘤发生中的作用。方法 用免疫组织化学技术En Vision~(TM)法检测48例骨肉瘤标本及25例成骨性良性肿瘤标本中ERK、JNK、P38蛋白的表达,并比较它们的差异。结果 ERK、JNK、P38三种蛋白在骨肉瘤组的阳性率分别为83.3%(40/48),72.9%(35/48)和85.4%(41/48),在成骨性良性肿瘤组中的阳性率分别为16.0%(4/25),12.0%(3/25)和20.0%(5/25),骨肉瘤组织中ERK、JNK、P38蛋白阳性率及阳性强度均明显高于成骨性良性肿瘤(P
目的:研究复合离子盐对自发性高血压大鼠肾脏功能及结构的影响,进一步探讨盐对高血压靶器官损害影响的可能机制。 方法:38只8周龄雄性自发性高血压大鼠随机分为4组:8%食盐摄入组SHR(HS group,n=10);1%复合离子盐组摄入SHR(CIS Ibrutinib group,n=10);1%复合离子盐+2.25%L-Arg摄入组SHR(CIS+L-Arg group,n=9);1%食盐摄入组SHR(NS group,n=9),饲料其余成分均相同,共干预12周。①干预期间定期观察大鼠体重、血压、进食量、饮水量、尿量、尿钠、尿钾及尿蛋白的变化;②12周末进行有创血压测量,检测血糖、甘油三酯及总胆固醇,检测血钠、血钾及肌酐清除率,进而计算FENa~+%(fractional excretion of sodium);放射免度法检测血液及肾皮质中Ang

Ⅱ、NO含量;进行肾脏组织HE及天狼猩红染色,观察病理变化并计算胶原容积分数进行半定量分析:③通过western-blot分析各组大鼠肾皮质MAPK/ERK蛋白表达的变化,初步探讨盐对高血压靶器官损害影响的可能机制。 结果: 1、四组大鼠血压在干预前无明显的统计学差异,干预12周后,复合离子盐摄入组及复合离子盐+L-Arg摄入组血压升高趋势明显低于1%食盐摄入组(222±6,212±2 vs.268±4 mmHg,P
目的:阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)即3-甲氧基-4-羟基-苯丙烯酸钠,是阿魏酸的合成钠盐,已被证明是一种非肽类内皮素受体拮抗剂,可清除自由基,防治脂质过氧化损伤;拮抗内皮素引起的血管收缩、升压、血管平滑肌细胞增值;减轻血管内皮损伤、增加一氧化氮(NO)合成、松弛血管平滑肌。SF与肾间质纤维化之间的关系如何,目前尚无定论。通过观察肾小管上皮细胞磷酸化p38MAPK、TGF-β1、α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscular actinα-SMA)的表达情况,研究阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用,探讨其肾脏保护作用的可能机制。 方法:选择健康雄性SD大鼠36只(购自河北医科大学试验动物中心),体重180-220g,随机分为假手术组(A组)12只,UUO模型组(B组)12只,阿魏酸钠治疗组(C组)12只。大鼠经2%戊巴比妥钠(50mg/kg)腹腔注射麻醉,仰卧位于手术台上,经侧腹部切口,暴露左侧肾脏,分离左侧输尿管于中上1/3处结扎并剪断,关闭腹腔,逐层缝合,A组开腹后不结扎输尿管,随即缝合腹腔作为对照。C组在术前3天给予阿魏酸钠(阿魏酸钠片溶于0.

431、74.816和30.440；P值均为0.000),不同时间之间也有显著性差异(F值分别为355.094、356.445和186.168；P值均为0.000),分组因素和时间因素之间存在交互效应(F值分别为51.834、45.956和17.810；P值均为0.000)。并且TAK242显著抑制了MRP8介导的HUVECs通透性增高,而anti-RAGE对MRP8介导的HUVECs通透性增高无影响；对于MRP14而言,anti-RAGE而非TAK242显著抑制了其介导的HUVECs通透性增高；而TAK242和anti-RAGE都可以抑制MRP8/14介导的通透性增高,并且当两种抑制剂合用时,其抑制效果更加显著。 (2)利用Western

Blot检测TAK242和anti-RAGE对MRP8, MRP14和MRP8/14介导p38和ERK1/2磷酸化水平增高的影响。结果显示：当MRP8刺激HUVECs时,各组之间p38和ERK1/2磷酸化水平均存在显著性差异(F值分别为49.885和86.672,P值均为0.000),TAK242而非anti-RAGE显著抑制了MRP8介导的p38和ERK1/2磷酸化水平增高；当MRP14刺激HUVECs时,各组之间p38和ERK1/2磷酸化水平均存在显著性差异(F值分别为11.023和8.402,P值均为0.000),并且与MRP8刺激不同,anti-RAGE而非TAK242显著抑制了MRP14介导的p38和ERK1/2磷酸化水平增高；当MRP8/14刺激HUVECs时,各组之间p38和ERK1/2磷酸化水平均存在显著性差异(F值分别为60.005和46.784,P值均为0.000),而TAK242和anti-RAGE都能抑制MRP8/14介导的p38和ERK1/2磷酸化水平增高,并且当两种抑制剂合用时,其抑制效果更加显著。

很少 以上结果提示：MRP8通过TLR4、MRP14通过RAGE激活p38和ERK1/2信号通路从而介导]HUVECs通透性增高；而MRP8/14既可以通过TLR4又可以通过RAGE介导HUVECs通透性增高。 4. MRPs介导HUVECs通透性增高是Ca2+依赖性的 (1)在有或者无MRP8(2.0μg/ml)的情况下,HUVECs在无Ca2+环境(PBS)中孵育30min,然后加入1.3mM的Ca2+,继续作用60min,测量TER。结果显示,各组之间存在显著性差异(F=136.026,P=0.000),不同时间之间也有显著性差异(F=187.980,P=0.000),而分组因素和时间因素之间存在交互效应(F=101.373,P=0.000)。在无Ca2+条件下不管是否有MRP8刺激,与正常对照组相比,HUVECs通透性都升高,但PBS组与”PBS+MRP8″组相比无显著性差异；当加入1.3mM的Ca2+后,PBS组通透性逐渐恢复,”PBS+MRP8″组HUVECs的通透性非但没有恢复,反而继续升高,与PBS组相比有显著性差异。这些结果表明：在没有Ca2+时,MRP8不能导致HUVECs通透性增加,而在正常Ca2+浓度下,MRP8才能导致HUVECs通透性增高,即MRP8介导的HUVECs通透性增加是Ca2+依赖性的。为了进一步证明MRP8介导HUVECs通透性增加是Ca2+依赖性的,我们先用无Ca2+液体(PBS)处理HUVECs30min,然后用经过浓度梯度Ca2+(0、0.25a、0.5a和a,a=0.37gM,为刚好饱和2.0μg/ml

更多 MRP8钙离子结合位点的Ca2+浓度)孵育的MRP8(2.0μg/ml)刺激60min。结果发现,不同组之间存在显著性差异(F=405.592,P=0.000),不同时间之间也有显著性差异(F=1647.036,P=-0.000),而分组因素和时间因素之间存在交互效应(F=128.156,P=0.000)。在相同浓度MRP8、不同浓度Ca2+刺激下,HUVECs通透性呈Ca2+浓度依赖性的增加。这进一步说明,MRP8介导的HUVECs通透性增加是Ca2+依赖性的。采用相同的方法,我们发现MRP14介导的HUVECs通透性增加也是Ca2+依赖性的。 NVP-BKM120分子重量 (2)另外,我们分别在正常Ca2+浓度和无Ca2+环境中利用MRP8(2.0μg/ml)和MRP14(2.0μg/ml)刺激HUVECs120min, western blotting检测p38和ERK1/2磷酸化水平的变化,结果发现：各组之间p38和ERKl/2磷酸化水平均存在显著性差异(F值分别为47.041和234.488,P值均为0.000),并且在无Ca2+条件下MRP8和MRP14都不能引起p38和ERK1/2磷酸化水平的增高；而在正常Ca2+下,MRP8和MRP14能够引起p38和ERK1/2磷酸化水平显著性增高。 以上结果提示：MRP8和MRP14都以Ca2+依赖性的方式激活p38和ERK1/2信号通路,从而导致HUVECs通透性增高。 结论： 1. MRP8、MRP14和MRP8/14都能够以时间依赖和剂量依赖的方式介导HUVECs通透性增高； 2. MRP8、MRP14和MRP8/14通过激活p38和ERK1/2信号通路介导HUVECs通透性增高； 3.MRP8主要通过TLR4、MRP14主要通过RAGE介导HUVECs通透性增高,而MRP8/14既可以通过TLR4又可以通过RAGE介导通透性增高； 4.

Cell viability was measured by 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)method.DNA fragmentation was visualizedby agarose gel electrophoresis.Phospho-p38 mitogen-activated protein kinase(MAPK)expression

查找更多 was detected by Western blotting.Results:Aspirin at lowconcentrations from 1×10~(-10)mol/L to 1×10~(-8)mol/L decreased the apoptosis andp38 MAPK pbosphorylation induced by H_2O_2 in BAEC,while high doses of aspi-rin(1×10~(-7)-1×10~(-4)mol/L)induced typical apoptotic changes in BAEC and stimu-lated the expression of phospho-p38 MAPK in a concentration-dependent manner.SB203580,a specific p38 MAPK inhibitor,blocked such effects.Conclusion:Aspirin exhibits a biphasic effect on the apoptosis in BAEC,reducing apoptosisat low concentration and inducing apoptosis at high concentration,p38 MAPKmay be an important signal molecule mediating the effects of aspirin.
Aim:To characterize the molecular mechanisms of nitrofen-induced pulmonaryhypoplasia.Methods:After administration of nitrofen to cultured type Ⅱ A549pneumocytes,cell proliferation and DNA 寻找更多 synthesis

were investigated by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide colorimetry,colony forma-tion assay,flow cytometry and[~3H]-thymidine incorporation assay.Apoptosiswas measured by terminal transferase-mediated dUTP nick-end-labeling,acridineorange-ethidium bromide staining and flow cytometry.Expression of proliferatingcell nuclear antigen (PCNA) and apoptosis-related genes was assayed byimmunofluorescence,RT-PCR and Western blot.Results:Nitrofen inhibited thecell proliferation of A549 cells in a dose-and time-dependent manner,accompa-nied by downregulation of PCNA.As a result,the DNA synthesis of nitrofen-treated A549 cells decreased,while cell cycle was arrested at G_0/G_1 phase.Moreover,nitrofen induced apoptosis of A549 cells,which

was not abolished by Z-Val-Ala-Asp(OCH_3)-fluoromethylketone.In addition,nitrofen decreased the expressionof Bcl-x_L,but not of Bcl-2,Bax,and Bak,resulting in a loss of mitochondrialmembrane 点击此处 potential and the nuclear translocation of apoptosis-inducing factor(AIF).Meanwhile,nitrofen strongly activated the p38 mitogen-activated proteinkinase (p38-MAPK).Pretreatment of cells with SB203580 (5 μmol/L) blockednitrofen-induced phosphorylation of p38-MAPK and abolished nitrofen-inducedAIF translocation and apoptosis in A549 cells.Conclusion:Nitrofen suppressesthe proliferation of cultured type Ⅱ pneumocytes accompanied by thedownregulation of PCNA,and induces mitochondria-mediated apoptosis involv-ing the activation of p38-MAPK.
AIM: To investigate whether heat shock pretreatment(HSP) improves mesenchymal stem cell(MSC) repair via autophagy following hepatic ischemia-reperfusion injury(HIRI).METHODS: Apoptosis of MSCs was induced by 250 m M hydrogen peroxide(H2O2) for 6 h. HSP was carried out using a 42 ℃ water bath for 1, 2 or 3 h.

20只普通级3月龄新西兰兔,随机分为空白血清组(0.9%生理盐水灌胃)与含药血清组(壮骨健膝方药液灌胃),连续灌胃5天,2次/日,于末次灌胃3h后腹主动脉采血,制备新西兰兔的正常血清及壮骨健膝方含药血清。 2.取4周龄普通级新西兰兔双侧膝关节透明软骨,建立离体培养的关节软骨细胞体系,应用形态学观察、甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色观察并鉴定,MTT法检测第2代软骨细胞增殖情况。 3.10ng/ml IL-1β诱导软骨细胞退变,甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色观察并鉴定；MTT法检测壮骨健膝方含药血清对退变软骨细胞增殖的影响,并确定含药血清干预的最佳时间及浓度。 4.诱导退变的软骨细胞随机分为模型组、含药血清组、阻滞剂组(SB203580干预)、含药血清+阻滞剂组,并设无IL-1p诱导干预的为正常组,分别干预48h后,流式细胞术检测细胞的凋亡率；Western Blot法检测软骨细胞中caveolin-1和p-p38蛋白的表达；RT-PCR检测细胞IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13及caveolin-1mRNA表达的变化。

结果 1.研究中分离培养的第2代关节软骨细胞,经形态学观察、甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色显示符合软骨细胞的生物学特性。IL-1p干预的关节软骨细胞呈现退变表现：细胞生长速度减慢,细胞变狭长,胞内见空泡,形态不规则,其甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色均变淡。 查找更多 2.壮骨健膝方含药血清对IL-1p诱导退变的软骨细胞增殖作用呈剂量依赖性的促进趋势,48h时,正常组、15%、20%含药血清组与模型组比较有显著性差异(p0.05),含药血清以20%为最佳干预浓度,其最佳干预时间为48h。

3.IL-lp诱导退变的软骨细胞再继续培养48h出现明显的凋亡,凋亡率达(14.17+0.43)%,含药血清组、阻滞剂组、含药血清+阻滞剂组细胞凋亡率明显降低,与模型组比较均有极显著差异(p<0.01)；含药血清+阻滞剂组与单纯阻滞剂组比较,凋亡率也显著下降(p
背景和目的 目前临床上在脂质代谢紊乱方面的治疗还主要集中在降低血浆低密度脂蛋白胆固醇(low-density selleck合成 lipoprotein cholesterol, LDL-C)水平方面。降低LDL-C水平减少罹患心血管疾病风险的观点已经得到广泛认同。然而临床结果显示经过他汀类药物标准治疗后即使LDL-C达标,仍有10.9%的心血管剩留风险。治疗新靶点研究(TNT)显示,经过他汀类药物强化治疗后即使LDL-C水平降至1.99mmol/L,明显低于达标水平,仍有8.7%的绝对冠状动脉事件剩留风险,提示即使经过他汀类药物强化治疗,冠状动脉事件剩留风险仍较高。血脂异常相关的心血管剩留风险与多种因素有关,以低高密度脂蛋白(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)为特征的血脂异常是经过他汀类药物治疗降低LDL-C水平后最常见的其中一种。如何降低冠状动脉事件剩留风险,减少心血管事件发生率,也是目前研究的焦点之一。HDL-C水平与心血管发生率呈负相关,约有1/3的血脂异常患者通过提高HDL-C水平而受益,有研究表明血浆HDL-C每升高0.03mmol/L(1.0mg/dl)就可以使罹患心血管疾病的风险下降2%-4%。另外LDL-C/HDL-C比值也是一个与心血管事件密切相关而独立于LDL-C和HDL-C的重要指标。因此治疗动脉粥样硬化除了在一定范围内降低LDL-C水平之外如何有效的提高HDL-C水平就成为了重要的研究方向。 内皮脂酶(endothelial lipase, EL)是近年新发现的甘油三酯脂肪酶家族新成员,直接由血管内皮细胞分泌,在局部发挥作用。主要具有磷脂酶活性,是代谢HDL-C的关键酶,如何能够通过减低或抑制EL活性,从而减少HDL-C的降解,是治疗动脉粥样硬化的新发展思路。因此研究EL的转录表达调节,如何有效的降低EL就显得极为迫切。 血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)和炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)是两种非常重要的致动脉粥样硬化危险因素。Ang Ⅱ能通过增加巨噬细胞清道夫受体CD36,促进巨噬细胞摄取氧化低密度脂蛋白(oxidized

low density lipoprotein,ox-LDL),加速泡沫细胞形成；能通过诱导炎症反应及细胞凋亡、产生氧自由基和影响纤溶功能等多方面参与动脉粥样硬化的病理过程;可以增加斑块不稳定因子[7]EMMPRIN和MMPs[8、9]的表达,加重动脉粥样硬化病变。IL-6也是一种重要的致动脉粥样硬化炎症因子,它构成了许多急慢性疾病的病理学基础,能够损伤内皮细胞造成内皮细胞功能障碍,增加单核-内皮细胞的粘附,还可以促进巨噬细胞对脂质的摄取。核因子NF-κB是种重要的核转录调节因子,激活后可启动包括细胞因子、化学因子等多种效应基因的表达。丝裂原活化蛋白激酶MAPKs级联反应是细胞内重要的信号传导系统之一,参与多种胞内信息传递过程,能对广泛的细胞外刺激发生反应,研究表明,NF-κB和p38MAPK在动脉粥样硬化中表达增加，可能是各种危险因子诱发动脉粥样硬化的机制之一,NF-κB和p38MAPK信号传导途径可能在EL的转录表达过程中发挥作用。本课题通过体外培养人脐静脉内皮细胞,以IL-6和Ang Tenofovir Ⅱ刺激内皮细胞,观察IL-6、Ang Ⅱ、NF-κB p65阻断剂PDTC (Pyrrolidinedithioearbamic acid)和SB203580(p38MAPK抑制剂)对EL表达的影响,验证IL-6和AngⅡ是否通过NF-κB和MAPK信号传导途径调节EL的表达。 研究方法 1.提取新生儿脐静脉内皮细胞进行原代培养,经鉴定为内皮细胞后,贴壁法传代培养。第四代细胞用于实验。 2.用于实验的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells.

05)。干预24小时后,给予牛蒡苷干预的Tca8113细胞p38MAPK及caspase-3的活化水平均有显著的上升,差异有统计学意义(P均
为研究脂多糖(LPS)对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)表达的影响及其分子机制,本研究通过荧光定量PCR检测不同浓度LPS作用不同时间对绵羊输卵管上皮细胞SBD-1 m RNA的相对表达量的影响,通过western blot检测经LPS处理后P38 MAPK通路的活化情况,通过荧光定量PCR检测经P38 MAPK通路抑制剂(SB203580和SB202190)处理后LPS对SBD-1 m RNA相对表达量的影响。结果表明,LPS呈浓度和时间依赖方式诱导绵羊输卵管上皮细胞中SBD-1的表达,100 ng/m L的LPS在12 h诱导效果最佳。进一步研究显示,100 ng/m L的LPS可以显著激活P38 MAPK通路,而其抑制剂SB203580和SB202190可以阻断LPS对SBD-1的诱导作用。这些结果表明,LPS可以诱导绵羊输卵管上皮细胞表达SBD-1,并且P38 MAPK参与调控这个过程。本实验结果为进一步研究β-防御素的调控机制,探索输卵管炎发病机理以及合理开发输卵管炎相关药物提供了实验依据。
目的研究磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(P-P38 mitogen-activated protein kinase,P-P38MAPK)和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在胃癌细胞株中的表达及二者的关系,探讨非甾体类抗炎药(non-steroidalanti-inflammatory

以及 drugs,NSAIDs)的抑癌机制。方法体外常规培养胃癌细胞株SGC7901。实验分为空白对照组(CON组)、NS398组(NS组)、SB203580组(SB组)、SB203580和NS398共同作用组(SBNS组)以及溶剂对照组(DMSO组)。用四甲基偶氮唑盐比色法检测药物对SGC7901细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞定量检测技术(flow cytometry,FCM)检测SGC7901细胞凋亡和细胞周期;应用FCM和蛋白免疫印迹(Western blot)检测SGC7901细胞中COX-2、P-P38MAPK蛋白的表达。结果各组药物作用于SGC-7901细胞均可诱导细胞凋亡,细胞凋亡率与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);抑制细胞增殖。CO)X-2蛋白表达SB组、NS组和SBNS组明显低于CON组(P<0.01);SBNS组明显低于NS组和SB组(P<0.01或P<0.05)。P-P38MAPK蛋白表达SB组明显低于CON组(P<0.05);而NS组和SBNS组明显高于CON组(P<0.05)。结论胃癌细胞株SGC7901中,P-P38MAPK是COX-2的上游激酶,可上调COX-2的表达,COX-2可能对P-P38MAPK有负反馈调节作用。P-P38MAPK活化后在胃癌细胞株SGC7901中的终效应是促进肿瘤细胞增殖。
目的研究蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物的抗炎作用机制。方法用Western

blot法检测RAW264.7细胞p38 MAPK的磷酸化水平与COX-2的蛋白表达。结果 5μg/ml蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物能抑制脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞p38 MAPK的磷酸化水平并且降低COX-2的蛋白表达;p38MAPK特异性抑制剂SB203580与蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物共同作用后抑制作用进一步加强。结论蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物通过抑制p38 确认细节 MAPK磷酸化而抑制了LPS诱导的RAW264.7细胞COX-2表达,这可能是蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物发挥抗炎作用的信号传导机制之一。
目的探究褪黑素对脂多糖刺激后大鼠腹腔巨噬细胞产生的NO、ROS、p38及磷酸化p38的影响及其相关机制。方法使用CCK8试验检测褪黑素对大鼠腹腔巨噬细胞的药物毒性;使用酶标仪检测NO的表达;使用荧光显微镜检测ROS的表达;RT-PCR法检测mRNA水平总p38的表达量;Western selleck怎么样

selleck中国

selleck blot法检测p38

MAPK通路中p38以及磷酸化p38的表达量。结果褪黑素对大鼠腹腔巨噬细胞无药物毒性。褪黑素及p38抑制剂(SB203580)均有效抑制了脂多糖刺激后大鼠腹腔巨噬细胞NO、ROS、以及磷酸化p38的表达,同时总p38的表达量并没有改变。结论褪黑素通过抑制p38 MAPK(mitogen-activated protein kinase)信号通路的激活进而减少脂多糖刺激后大鼠腹腔巨噬细胞的NO(P=0.000)和ROS(P=0.000)的产生。
目的观察大黄素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)p38MAPK/CREB/PPARγ/CTGF蛋白表达的影响,以探讨大黄素抑制高糖培养的GMC增殖及纤维化的可能机制。方法 Western blot方法检测p-p38MAPK/p-CREB/PPARγ/CTGF蛋白表达情况。结果高糖能够诱导大鼠GMCp-p38MAPK/p-CREB/CTGF表达增加,抑制PPARγ蛋白表达,与正常对照组比较差异有统计学意义(P
目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对内皮细胞通透性的影响,以及HMGB1受体(RAGE)和p38 MAPK通路在此病理过程中的作用。方法 HMGB1(200 ng/m L)与人脐静脉内皮细胞株分别在体外共同培养0、3、6、12和24 h,以0 h为对照检测HMGB1诱导单层内皮细胞通透性Pd改变的时间效应;用电阻法分别在0、3、6、12和24 h测量正常空白对照组(单纯培养基)和HMGB1组(200 ng/m L)的单层内皮细胞电阻值TER,比较两组间在相同时间点电阻值的差别;p38 MAPK抑制剂SB203580(25μmol/L)预先作用1 h,继以HMGB1(200 ng/m L)作用12h,比较不同组间细胞通透性的变化;以HMGB1(200 ng/m L)分别作用0、10、20、30、60 min后观察细胞内p38蛋白表达及磷酸化p38表达的时间效应;转染siRNA下调RAGE表达,或以原代培养野生型和RAGE(-/-)小鼠肺微血管内皮细胞培并继以HMGB1刺激,比较各组细胞内磷酸化p38蛋白表达的变化。通透性检测采用FITC荧光标记右旋糖酐漏出法及跨内皮电阻(TER)测定法,蛋白表达用免疫印迹法检测。结果 HMGB1以时间依赖的方式引起单层内皮细胞通透性Pd的升高,12 h与0 h相比,差异有统计学意义(P<0.

6%)高于对照组(80.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者血淀粉酶以及白细胞达到正常范围的时间、腹痛症状改善时间与住院天数方面显著短于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论参麦注射液联合生长抑素治疗重症急性胰腺炎效果显著,可以明显改善患者血清TNF-α、IL-6及IL-10水平。
目的探讨Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对Src蛋白及其下游信号作用。方法采用半定量RT-PCR法检测Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后的人膀胱癌细胞T24各浓度组(0、0.2、1.0、5.0μmol/mL组)的c-Src、p38MAPK基因表达的变化情况,使用Western blot检测Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后T24细胞内的c-Src蛋白磷酸化类型与非磷酸化类型的表达情况。结果 Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理有下调后的人膀胱癌细胞T24各浓度组的c-Src mRNA的表达下调;p38基因的表达呈逐渐下调趋势。处理后T24细胞内c-Src基因在蛋白表达水平上其磷酸化类型随Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ浓度的增高表达逐渐下降,并且呈剂量效应关系。结论 Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ可能通过竞争Src蛋白磷酸化位点,使其不能激活,导致下游的细胞传导途径失活使得T24细胞增殖得到抑制,认为Src蛋白具有作为膀胱移行细胞癌分子靶向治疗的潜在靶点的可能性。Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ可能可以通过阻止Src蛋白激活影响其下游的Ras/Raf/MEK/MAPK(ERK1/2或p38)通路和ERK1/2和p38细胞信号传导通路,下调p38表达不仅直接和间接地诱导T24细胞凋亡,而且可以阻止或减少T24细胞的迁移、扩散和穿膜侵袭的发生。
目的分析并探讨支气管哮喘患儿吸入糖皮质激素对生长发育的影响情况。方法择取我院所收治的支气管哮喘患儿60例作为研究对象,均接受小剂量糖皮质激素吸入治疗。选择同期健康儿童60例作为对照组。对两组进行为期1年的随访调查,就身高、体重、骨代谢水平进行综合对比与分析。结果哮喘组患儿1年内身高增长均值、体重增长均值、骨密度水平均值与对照组对比无明显差异(P>0.05),无统计学意义。结论以小剂量吸入糖皮质激素方法对支气管哮喘患儿进行治疗,对儿童生长发育无明显不良影响,可作为临床常规用药方案,具有安全性优势,值得进一步推广。
目的通过分析丝裂原和应激激活蛋白激酶1(MSK1)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的表达情况探讨中药复方益肾达络饮保护小鼠损伤脑组织的机制。方法利用蛋白印迹技术,检测小鼠脑组织中MSK1、CREB的含量。结果脑组织中MSK1表达显示,正常组和中药组、激素组、抑制剂组均有显著性差异(均P<0.01);模型组和抑制剂组有显著性差异(均P<0.01);中药组和激素组、抑制剂组有显著性差异(P<0.01);中药组和模型组、中药加激素组有差异(均P<0.05)。CREB表达显示:中药组CREB的表达与其余各组相比均显著升高(P<0.01);中药组、中药加激素组和激素组的CREB水平依次降低。结论复方益肾达络饮治疗EAE与MSK1升高有关,p38MAPK信号通路下游因子MSK1表达与其底物CREB表达呈相同态势。
Colorectal

点击此处 通常 cancer(CRC)remains one of the most common malignancies in 很少 the world.Although surgical resection combined with adjuvant therapy is effective at the early stages of the disease,resistance to conventional therapies is frequently observed in advanced stages,where

treatments become ineffective.Resistance to cisplatin,irinotecan and 5-fluorouracil chemotherapy has been shown to involve mitogen-activated protein kinase(MAPK)signaling and recent studies identified p38αMAPK as a mediator of resistance to various agents in CRC patients.Studies published in the last decade showed a dual role for the p38αpathway in mammals.Its role as a negative regulator of proliferation has been reported in both normal(including cardiomyocytes,hepatocytes,fibroblasts,hematopoietic and lung cells)and cancer cells(colon,prostate,breast,lung tumor cells).This function is mediated by the negative regulation of cell cycle progression and the transduction of some apoptotic stimuli.However,despite its anti-proliferative and tumor suppressor activity in some tissues,the p38αpathway may also acquire an oncogenic role involving cancer related-processes such as cell metabolism,invasion,inflammation and angiogenesis.In this review,we summarize current knowledge about the predominant role of the p38αMAPK pathway in CRC development and chemoresistance.In our view,this might help establish the therapeutic potential of the targeted manipulation of this pathway in clinical settings.

Results:Nitrofen inhibited thecell proliferation of A549 cells in a dose-and time-dependent manner,accompa-nied by downregulation of PCNA.As a result,the DNA synthesis of nitrofen-treated A549 cells decreased,while cell cycle was arrested at G_0/G_1 phase.Moreover,nitrofen induced apoptosis of A549 cells,which was not abolished by Z-Val-Ala-Asp(OCH_3)-fluoromethylketone.In addition,nitrofen decreased the expressionof Bcl-x_L,but not of Bcl-2,Bax,and 此网站 Bak,resulting in a loss of mitochondrialmembrane potential and the nuclear translocation

of apoptosis-inducing factor(AIF).Meanwhile,nitrofen strongly activated the p38 mitogen-activated proteinkinase (p38-MAPK).Pretreatment of cells with SB203580 (5 μmol/L) blockednitrofen-induced phosphorylation of p38-MAPK and abolished nitrofen-inducedAIF translocation and apoptosis in A549 cells.Conclusion:Nitrofen suppressesthe proliferation of cultured type Ⅱ pneumocytes accompanied by thedownregulation of PCNA,and induces mitochondria-mediated apoptosis involv-ing the activation of p38-MAPK.
AIM: To investigate whether heat shock pretreatment(HSP) improves mesenchymal

stem cell(MSC) repair via autophagy following hepatic ischemia-reperfusion injury(HIRI).METHODS: Apoptosis of MSCs was induced by 250 m M hydrogen peroxide(H2O2) for 6 h. HSP was carried out using a 42 ℃ water bath for 1, 2 or 3 h. Apoptosis of MSCs was analyzed by flow cytometry, and Western blot was used to detect Bcl-2, Bax and cytochrome C expression. Autophagy of MSCs was analyzed by flow cytometry and transmission electron microscopy, and the expression of beclin Ⅰ?and Doxorubicin临床试验 LC3-Ⅱ was detected by Western blot. MSCs were labeled in vivo with the fluorescent dye, CM-Dil,

and subsequently transplanted into ABT-263 the portal veins of rats that had undergone HIRI. Liver levels of proliferating cell nuclear antigen(PCNA) were quantified by fluorescent microscopy. Serum aminotransferase activity and the extent of HIRI were also assessed at each time point.RESULTS: HSP for 2 h reduced apoptosis of MSCs induced by H2O2 as seen by a decrease in apoptotic rate, a decrease in Bax and cytochrome C expression and an increase in Bcl-2 expression(P < 0.001). In addition, HSP for 2 h induced autophagy of MSCs exposed to H2O2 as shown by an increase in acidic vesicular organelle-positive cells, beclin 1 and LC3-Ⅱ expression, and autophagosome formation(P < 0.05). Treatment with 3-methyladenine attenuated HSPinduced autophagy and abolished the protective effects of HSP on the apoptosis of MSCs. Rapamycin failed to have additional effects on either autophagy or apoptosis compared with HSP alone. The phosphorylation of p38 MAPK was significantly elevated and the phosphorylation of m TOR was downregulated in heat shock pretreated MSCs. Treatment with the p38 MAPK inhibitor, SB203580, reduced HSP-induced autophagy in MSCs.