随着技术的进步以及更多微孢子虫的检出,使人类能够更好地认识微孢子虫、并制定微孢子虫准确快速检测方法和防控策略。
实验室前期shot-gun质谱结果表明PCSK9在PAM空细胞和PRRSV感染组PAM细胞间存在差异表达。为了深入研究PCSK9与PRRSV间的相互作用机制,本实验在体外合成猪PCSK9基因抑制剂并克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-PCSK9。利用该原核表达系统获得了高效表达的重组蛋白PCSK9(约75 kd),进一步通过镍柱亲和层析技术纯化重组蛋白PCSK9作为免疫原,皮下免疫5-6周龄的Balb/c小鼠(100 ng/只),获得了一株产生PCSK发现更多9特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2A2B12)。应用此单克隆抗体对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染PAM细胞后的内源性PCSK9变化情况进行了检测。Western blot和IFA结果表明本实验制备的PCSK9单克隆抗体具有良好的特异性,抗体针对的表位位于PCSK9的C端结构域(4以及63-705aa);此外,western blot 结果表明PRRSV感染可抑制PCSK9蛋白的表达,反过来,过表达PCSK9对PRRSV的复制有明显的抑制作用。本研究中研制的抗体可为今后猪源PCSK9与PRRSV的相互作用研究提供工具支持。
目的 观察胃癌患者的胃底部酶原比值(PGR)、胃泌素-17 (G-17)和幽门螺杆菌抗体(Hp-IgG)筛查水平。