第一部分IGFBP7、VEGF、Caspase-3在恶性黑素瘤的表达 目的研究IGFBP7、VEGF、Caspase-3在C57BL／6J荷瘤鼠B16-F10恶性黑素瘤中的表达,探讨IGFBP7作为恶性黑素瘤基因治疗靶点的可能性。 方法培养B16-F1O鼠恶性黑素瘤细胞系,将B16-F10细胞制成细胞悬液注射入C57BL／6J荷瘤鼠背部；待5周Bcompound screening assay16-F10恶性黑素瘤组织形成后,手术取下标本,并用免疫组化检测IGFBP7、VEGF、Caspase-3在上述恶性黑素瘤组织中的表达；分析IGFBP7与VEGF、Caspase-3表达的相关性。 结果培养B16-F1O细胞及构建恶性黑素瘤荷瘤鼠模型成功。病理示肿瘤组织内细胞呈梭形,异形性明显；免疫组化S100在该黑素瘤细胞有中强表达,证实为恶性黑素瘤。IGFBP7在C57BL／6J小鼠皮肤中的表达较荷瘤鼠恶性黑素瘤组织中的表达高(W=261.50,P0.05),实验结果提示pcDNA3.1-IGFBP7质粒可增加I GFBP7mRNA表达且不对β-actin mRNA的表达造成影响。转染了pcDNA3.1-IGFBP7质粒48小时后B16-F1时间0黑素瘤细胞的增殖明显受到抑制(P<0.01)。其抑制增殖效应随pcDNA3.1-IGFBP7质粒浓度的增加而上升,呈剂量浓度依赖性。最大的抑制效应出现在pcDNA3.1-IGFBP7(质粒量为1μg)在转染24小时后,而转染pcDNA3.1-CONTROL及无质粒转染组的细胞增殖差异无显著性；实验结果表明转染pcDNA3.1-IGFBP7可通过增加IGFBP7的合成及分泌抑制B16-F10细胞的增殖。