本文以克罗诺杆菌属具有代表性的两株模式菌株（丙二酸盐阳性克罗诺杆菌和阪崎肠杆菌）为实验对象，建立了一套集一步法DNA提取和快速实时荧光PCR检测为一体的速测技术体系。通过优化，建立的快速实时荧光PCR反应程序可将扩增时间由普通程序的82min缩短至27min18s。建立的一步快速DNA提取流程，取样后仅需12 min热循环反应即可直接获取DNA，简Autophagy 抑制�?library便快捷。与传统方法的对比结果显示，快提法与传统煮沸法对纯菌液和人工污染培养前6 h的样品灵敏度一致；对人工污染样品培养7h、8h时，快检法的灵敏度比传统方法低一个数量级。本研究建立的微生物速测技术快速简便、且具有较高灵敏度，在口岸食源性病源微生物现场快速检测方面具有较好的应用前景。
目的通过设计特异性引物来AZD1152生产商鉴定广地龙及其混伪品。方法提取广地龙及其混伪品的DNA。利用通用引物COⅠ序列对广地龙及其混伪品进行PCR扩增,并对扩增产物进行双向测序。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,找出广地龙的变异位点,设计出广地龙的特异性引物,用于广地龙及其混伪品的鉴定。对PCR反应条件退火温度、循环次数、DNA模板量和Taq酶用量进行适应性哪里考察。结果 COⅠ序列不存在特异性,不同物种、不同品种的动物药均可扩增出750 bp大小的片段,无法鉴定广地龙及其混伪品。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,设计出广地龙的特异性引物PA-f/PA-r。在建立的PCR反应体系中,只有广地龙可以获得574 bp的基因片段,其他混伪品未扩增出相应条带。结论设计的广地龙特异性引物可以准确、成功鉴别广地龙,与其他混伪品区分,为广地龙的品种鉴别提供了有效的方法。