据此,我们推测VASN可能是Hp致胃黏膜癌变的关键分子,能够促进胃癌的发生和发展。然而,至今未有研究报道VASN在胃癌发生发展及Hp致病中作用,VASN与胃癌、Hp感染的关系及其表达调控机制有待阐明。因此,本文研究了VASN和Hp感染相关胃黏膜癌变过程的关系,以及在胃癌中的分子功能和机制,以期为胃癌的预防和分子治疗提供实验和理论依据。材料和方法(一)筛选和鉴定Hp感染致胃黏膜上皮PF-02341066小鼠细胞病变的核心基因VASN1.转录组学筛选Hp及Cag A致胃上皮细胞改变的核心基因(1)体外构建野生型(WT)及Δcag A Hp菌株感染的GES-1细胞模型,提取细胞总RNA进行RNA测序分析,并进行基因表达差异分析;(2)q RT-PCR验证核心差异基因在Hp WT及HpΔcag A菌株感染后GES-1细胞中的表达变化,选择其中经验证后最关键的核心17-AAG基因进行后续研究。2.细胞水平验证Hp及Cag A对VASN蛋白表达的影响(1)不同Hp WT菌株包括7.13、PMSS1、ATCC43504、G27和CCS9803分别感染GES-1细胞;(2)7.13和PMSS1以不同感染复数(MOI)分别感染GES-1细胞和AGS细胞,确定最适MOI;(3)7.13和PMSS1 WT及Δcag A菌株分别以最适MOAkt tumorI感染GES-1细胞和AGS细胞,Western blot检测VASN的表达。3.动物水平验证Hp感染对VASN蛋白表达的影响构建Hp感染的C57BL/6小鼠模型,Western blot检测小鼠胃黏膜组织中VASN的表达。4.VASN在临床患者胃黏膜病变过程中的表达以及与Hp感染的关系分别收集Hp阳性和Hp阴性的不同胃黏膜病变阶段包括轻度非萎缩性胃炎、重度非萎缩性胃炎、肠上皮化生、胃癌患者的胃黏膜标本,免疫组化检测VASN的表达。