应用本研究建立的RAA法检测感染多房棘球蚴的动物组织样本以及模拟和现场阳性犬粪便样本结果均为阳性,且与PCR法检测结果一致。结论本研究建立了一种反应快捷、敏感性和特异性均较高的RAA检测方法,其在多房棘球绦虫虫种鉴定以及棘球蚴病基因诊断方面展现出较好应用前景。
[目的]探讨miR-142下调甲基转移酶DNMT1是否影响乳腺癌细胞的迁移。[方法]过表不达miR-142后通过蛋白质印迹和q PCR检测DNMT1的表达。通过荧光素酶报告基因活性测定验证miR-142和DNMT1的3′UTR结合。[结果]在MDA-MB-231细胞中过量表达miR-142后,DNMT1蛋白水平与对照组相比下降,同时,乳腺癌细胞迁移的能力与对照组相比明显下降。敲降DNMT1,乳腺癌细胞迁移的能力与对照组相Vistusertib比也明显下降。并且,miR-142可与DNMT1的3′UTR区域直接结合,抑制DNMT1的表达。[结论]在乳腺癌细胞中,miR-142可通过靶向DNMT1下调其表达来抑制乳腺癌细胞的迁移。
[目的]克隆非洲爪蛙prmt5. L基因并分析其在胚胎发育中的时空表达谱。[方法]收集胚胎,提取总RNA,反转录制备c DNA。设计Torin 2特异引物,PCR扩增prmt5. L基因的ORF序列,连接到p CS2+载体构建p CS2+prmt5. L重组质粒,连接位点为EcoRⅠ和XhoⅠ。经双酶切和测序验证成功构建p CS2+prmt5. L重组质粒。将p CS2+prmt5. L重组质粒用EcoRⅠ酶切,T7 RNA聚合酶转录获得prmt5. L的反义探针。收集不同时期的爪蛙胚胎,固定并脱水后经原位杂交检测prmt5. L在胚胎发育中的表达情况。