培养人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3),用不同浓度的LPS、p38MAPK和JNK信号通路抑制剂(分别为SB203580、SP600125)分别刺激细胞24h,用
目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路在络气虚滞型血管内皮功能障碍模型大鼠血清诱导的内皮细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)表达中的作用及通络药物保护血管内皮,防治血管病变的作用机制。方法首先建立络气虚滞型血管内皮功能障碍(VED)大鼠模型,用模型大鼠血清体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞株,实验分为5个组:空白对照组、正常血清组、模型血清组、通心络(TXL)组、SB203580组。采用Western blot技术检测各组中F-actin、p38、磷酸化p38(phospho-p38)蛋白表达的变化。结果与空白对照组和正常血清组比较,模型血清组F-actin的蛋白表达…
目的探讨MAPK(mitogen-activated protein kinases)信号通路在瑞芬太尼预处理减轻心力衰竭大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用及其机制。方法成年雄性SD大鼠,尾静脉注射阿霉素,制备慢性心力衰竭模型,通过随机数字表将72只模型大鼠分为9组:假手术组(sham,n=9),缺血再灌注组(IR,n=9),瑞芬太尼预处理组(RPC,n=9),ERK抑制剂PD98059+RPC组(RPD,n=9),p38抑制剂SB203580+RPC组(RSB,n=9),JNK抑制剂SP600125+RPC组(RSP,n=9)以及抑制剂对照组PD(n=6)、SB(n=6)、SP(n=6)。化…
研究背景严重烧伤又称“烧伤病”,它所带来的问题不只是皮肤的损伤,还引起全身各系统和各脏器代谢和功能的一系列变化。近年来,有人称烧伤为“一种创伤后炎症反应性疾病”(a
post-trauma inflarnmato- ry disease)。“反应性”是生物固有的特性,对于多细胞、多脏器、多系统的高级生物来说,位于深部的细胞无法直接接受外部环境的刺激,在很大程度上根据来自其它细胞的信息调整自身的反应。细胞与细胞之间的信息交流除了靠神经系统之外,还通过信号细胞释放的各种信号物质,当这些物质作为“配体”与靶细胞的受体相结合时,就能改变靶细胞的代谢和功能。受体后信号调控是指对配体受体结合后发生的…
目的:探讨P38MAPK在大鼠重症急性胰腺炎急性肺损伤发病机制中的作用,观察肺组织中炎症因子水平、血中内毒素、淀粉酶含量等相关指标的变化及中药清胰汤的影响,进一步明确清胰汤的作用机理。方法:健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抑制剂组、清胰汤组。除假手术组外,其余三组大鼠经胰胆管逆行注入去氧胆酸钠复制大鼠重症急性胰腺炎急性肺损伤模型。柳制剂组为术前1h腹腔注射SB203580,1mg/Kg。清胰汤组于术前1h及术后清醒时灌胃,1ml/kg。术后24h采取标本做病理检查和各项指标检测。肺组织ICAM-1、P38MAPK的检测方法采用Western 不 PFI-2订购 Blot法。肺组织TNF-a检测采用放免法。肺…
目的:观察p38MAPK信号通路抑制剂–SB203580对内毒素休克大鼠生物喋呤／NO表达的影响,并探讨 p38MAPK信号通路在生物喋呤诱生中的作用机制及意义。方法:采用内毒素休克模型,56只大鼠随机分为正常对照组(n=8)、内毒素休克组(n=32)和SB203580拮抗组(n=16),留取肝、肺、肾组织测定三磷酸鸟苷环水解酶I(GTP-CHI)与诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达,同时测定血浆与相应器官中BH4、
目的动脉粥样硬化(AS)已公认是一种炎症反应性疾病,诱导型环氧合酶(COX-2)及CD40与其配体
Obeticholic Acid NMR (CD40L)参与AS进程的多种炎性因子调节。CD40L对COX-2表达影响的研究尚不多见,为此,我们观察了 rhCD40L刺激对U937细胞表达COX-2的影响,并从细胞内信号转导通路的水平探讨其潜在的机制。方法以终浓度为0．05、0．1、0．2、0．4μg／ml的rhCD40L分别刺激U937细胞;0．4μg／ml的rhCD40L分别刺激3、6、12、24h;RI:PCR及Westen blot分别检测 COX-2mRNA和蛋白表达,ELISA检测PGE2活性代表COX- 2酶活性。分…
目的探讨p38蛋白激酶对LPS诱导肺泡巨噬细胞活化的调控机制。方法分离培养肺泡巨噬细胞。设正常对照组、LPS刺激组、SB203580(p38蛋白激酶抑制剂)干预组、PDTC(NF-κB抑制剂)干预组和SB203580+PDTC干预组。分别采用免疫细胞化学和蛋白质印迹检测NF-κB、p38蛋白激酶和NF-κB 抑制蛋白(Ⅰ-κB)的表达。结果 LPS刺激肺泡巨噬细胞胞核NF-κB和p38蛋白激酶染色显著增强,胞核染色阳性细胞百分比分别由正常对照组的(7．34±1．33)％、(6．12±2．15)％上升到(38．52± 9．71)％、(35．20±8．51)％,而Ⅰ-κB的表达较正常对照组显…
目的探讨P38MAPK与iNOS在肾脏缺血预处理时两者的上下游关系,旨在阐明肾脏缺血预处理延迟保护的可能机制。方法选用180-220g雄性wistar大鼠60只． SB203580(P38MAPK特异性抑制剂),氨基胍(AG)(iNOS特
目的:乳腺癌是女性最普遍的恶性肿瘤,乳腺癌转移是造成患者死亡的主要原因,迄今为止乳腺癌转移的发病机理尚不清楚。我们前期建立了具有高转移倾向的乳腺癌 LM—MCF-7细胞系。本文应用MLCK的特异性抑制剂 ML-7作用LM—MCF-7细胞,旨在进一步探讨ML-7在 LM—MCF-7细胞生长、浸润、运动和凋亡等方面的作用。此外,还应用多种激酶相关抑制剂,采用免疫荧光、免疫印迹等实验方法对上述作用的机制和相关信号传导途径进行了深入研究。方法:应用20 μmol／L ML-7作用于LM— MCF-7细胞,测定细胞生长曲线并应用MTT检测细胞的增殖变化,台盼兰染色检测细胞的死亡率,应用Annexin V…
目的观察红茶多酚对牛主动脉内皮细胞(BAECs)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,用蛋白免疫印迹测定 p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化表达。结果不同浓度红茶多酚对牛主动脉内皮细胞(BAECs)均有明显抑制作用,呈剂量时间依赖关系;红茶多酚(0.