利用基因工程技术构建ILK siRNA,PCR鉴定阳性重组子后,测序验证。2.大鼠肾小管上皮细胞株(NRK-52E)分设正常组及CsA诱导组,后者分别采用CsA不同浓度和时间处理,观察细胞增殖抑制情况。3.将NRK52E细胞培养分为5组:空白对照组(A组):仅加入含10%胎牛血清的H-DMEM培养基;CsA处理组(B组):细胞培养液加CsA(lmg/L);干预1组(C组):加TGF-pi阻断剂(SB…
研究背景:甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)系肝细胞分泌的血浆蛋白,是天然免疫系统中的关键分子。本实验室曾报道MBL影响树突状细胞的分化成熟,并以浓度依赖方式调节 Raji细胞增殖,提示MBL不仅发挥天然免疫作用,而且具有一定的免疫调节功能。但目前尚未见MBL影响单核细胞(monocyte,Mo)增殖的报道。本实验以人Mo为研究对象,探索MBL对其增殖的影响及其作用机制。目的:观察MBL对人Mo增殖、凋亡及细胞周期的影响,并初步探讨其分子机制。方法:分离人外周血单个核细胞(peripheral
blood mononuclear cell,PBMC),磁式…
目的:探讨脐带间充质干细胞(UC-MSCs)上调系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性T细胞(Treg)的作用机制。方法:20例SLE患者及正常人外周血单个核细胞(PBMC)分别与UC-MSCs以1:1,10:1及50:1比例共培养72 不 h,流式细胞术检测PBMC中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例。分别以SLE患者及正常人PBMC及血清刺激UC-MSCs,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测UC-MSCs TGF-β1 mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测共培养上清TGF-β1表达水平。并构建
目的:研究生长因子TGF-β1、Activin A及TGF-β/Activin信号通路特异性受体抑制剂SB431542单独以及联合应用对牙髓细胞表达Nanog的影响,探讨TGF-β/Activin信号通路对Nanog的调控作用。方法:采用不同浓度的TGF-β1、Activin A和SB431542刺激第3~5代人牙髓细胞,检测刺激因子浓度对Nanog表达的影响;将TGF-β1、Activin A刺激细胞0、3、6、12、24、48、72h,检测不同时间Nanog表达的变化量;选取合适浓度的TGF-β1、Activin A和SB431542分别及联合处理牙髓细胞,再以SB431542处理过表达N…
【目的】通过调控骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达观察其对石英致矽肺纤维化的作用及机制;探讨外源性小分子通路抑制剂对石英致矽肺纤维化进程的影响。【材料和方法】使用不同浓度石英染小鼠巨噬细胞上清液刺激大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN),建立剂量梯度模型,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化及迁移能力的改变。应用慢病毒转染技术建立BMP-7过表达及沉默稳转的RLE-6TN细胞系观察其对石英致矽肺纤维化的影响。抑制剂研究分别给予TGF-β抑制剂SB-431542或BMP抑制剂LDN-193189进行预处理。通过检测羟脯氨酸(Hyp)含量反应纤维化程度,应用实时荧光定量PCR及Western
不 Blo…
【目的】研究邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)对离体大鼠睾丸支持细胞vimentin骨架系统的破坏作用并探索对PPARα(peroxisome proliferation-activated receptorα)及下游MAPK、Smad2/3信号途径在DBP导致vimentin骨架系统损伤中的作用机制。【材料和方法】体外原代培养大鼠睾丸支持细胞,用100μM DBP处理细胞。用免疫组化和激光共聚焦显微镜观察vimentin骨架系统在支持细胞中的表达和分布情况,用Western blotting检测PPARα、vimentin、磷酸化vimentin、MAPK、…
目的:研究转化生长因子-β1(transformed growth factor-β1,TGF-β1)对人成熟树突状细胞(mature dendritic cells,m DCs)细胞骨架、运动能力和免疫功能的影响及潜在分子机制,为深入了解肿瘤免疫逃逸机制和提高DCs抗肿瘤疫苗疗效提供理论依据。方法 :利用免疫磁珠从新鲜人外周血中分选出CD14~+单核细胞,在体外经肿瘤坏死因子-α、重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-4诱导培养7天后分化为m
DCs,用5 ng/ml浓度的TGF-β1分别处理m DCs 15,30,60,120,360,720,1440 min,观察F-actin,…
目的:树突状细胞(dendritic cells,DCs)是目前发现的人体内功能最强大的抗原递呈细胞,肿瘤微环境中的抑制性细胞因子能够影响DCs的免疫功能和微观流变学特性,转化生长因子-β_1(transformed growth factor-β_1,TGF-β_1)是肿瘤微环境中重要的抑制性细胞因子。研究TGF-β_1对人成熟树突状细胞(mature 确认细节 dendritic cells,mDCs)骨架蛋白的影响及潜在的分子机制,为深入研究肿瘤的免疫逃逸机制和提高基于DCs的抗肿瘤免疫治疗
目的采用海人酸致痫SD大鼠模型,通过腹腔注射ALK5抑制剂(SB431542)干扰ALK5受体,观察癫痫大鼠海马组织中ALK1及其下游分子p-Smad1的mRNA及其蛋白的表达,研究癫痫大鼠ALK5对ALK1受体的作用,探讨可能的干预癫痫发作的新靶点。方法红藻氨酸(kainic acid,KA)侧脑室注入SD大鼠
背景和目的脑卒中后神经干细胞移植治疗能够有效的促进神经功能的恢复,但是如果高效均一性神经干细胞仍不明确。随着成纤维细胞成功诱导为多潜能干细胞,白体移植得以实现并且避免了许多伦理问题。诱导型多潜能干细胞在形态、功能和诱导过程上都与胚胎干细胞非常类似,而在诱导效率和诱导可控性上要比胚胎干细胞差。既往研究发现,骨发生蛋白(BMP)加LlF能够
目的脑卒中后形成的胶质瘢痕是阻碍轴突再生的主要因素之一,本课题拟研究RGMa在大脑中动脉阻塞/再灌注模型(MCAO/再灌注)大鼠胶质瘢痕形成过程中发挥的作用及机制。材料与方法 1、成年雄性SD大鼠随机分成假手术2d、7d、14d组,MCAO/再灌注模型2d、7d、14d组、MCAO/再灌注+RGMa特异性拮抗多肽6FNⅢ7d、14d组、
Introduction:Smoke-inhalation injury causes a destruction ofthe ciliated epithelium that lines the tracheobronchial tree.