3.通过瞬时转染构建miR-1277-5p过表达和干扰胃癌细胞模型,通过MTT法、划痕实验和Transwell细胞迁移和侵袭实验检测miR-1277-5p对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和运动等生物学行为的影响。4.通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-1277-5p与上游lncRNA、miR-1277-5p与目的基因的相互作用关系。采用Western b可能lot和实时定量PCR法检测胃癌细胞过表达和干扰miR-1277-5p与上游lncRNA后靶基因的表达水平变化进一步验证lncRNA/miR-1277-5p/靶基因调控轴的相互作用关系。通过瞬时转染构建上游lncRNA过表达和干扰胃癌模型,通过MTT法、划痕实验和Transwell细胞迁移和侵袭实验检测上游lncRNA对胃癌mTOR cancer细胞增殖、迁移、侵袭和运动等生物学行为的影响。结果1.生物信息学结果显示,lncRNA HOTAIR和COL5A1在胃癌组织中高表达,且高表达lncRNA HOTAIR和COL5A1与胃癌患者的总生存期呈负相关。miR-1277-5p作为lncRNA HOTAIR和COL5A1的共同靶向miRNA,其表达与lncRNA HO更多TAIR的表达呈负相关,由此构建出胃癌中lncRNA HOTAIR/miR-1277-5p/COL5A1靶向调控轴。2.Western blot和实时定量PCR结果表明,相对于正常人胃黏膜细胞(GES-1),胃癌细胞(SGC-7901、MGC-803、AGS、HGC-27和MKN-45)中COL5A1处于高表达状态,且COL5A1在胃癌组织中的表达高于癌旁组织。干扰COL5A1后,胃癌细胞的增殖能力降低。