(3)将细胞株分为三组对照组(不加5-Aza和5-FU)、5-FU组(加100μg/mL,不加5-Aza)、5-Aza+5-FU组(同时加10μg/mL 5-Aza和100μg/mL 5-FU),PCR检测两种结肠癌细胞株hMLH1和hMSH2 mRNA水平;Western Blot检测两种结肠癌细胞株hMLH1和hMSH2蛋白水平;流selleckchem式细胞仪检测两种结肠癌细胞株凋亡水平。(4)构建结肠癌原位移植瘤小鼠模型;(5)将结肠癌原位移植瘤模型小鼠分为三组对照组(不加5-Aza和5-FU)、5-FU组(注射剂量为2.5 mg·kg~(-1)·d~(-1),每周2次,持续4周)、5-Aza+5-FU组(同时注射5-Aza和5-FU,注射剂量为25 mgSelleck Luminespib·kg~(-1)·d~(-1),每周2次,持续4周),每组10只。观察小鼠结肠癌原位移植瘤大小,并采用PCR检测移植瘤hMLH1和hMSH2 mRNA水平;Western Blot检测移植瘤hMLH1和hMSH2蛋白水平和细胞凋亡水平。结果(1)在一定5-Aza浓度范围内,细胞株HT-29、SW480 hMLHPI3K/Akt/mTOR抑制剂1和hMSH2启动子区的甲基化程度随着5-Aza浓度升高而降低,最佳5-Aza浓度为10μg/mL。(2)不同浓度5-Aza对细胞株HT-29、SW480的存活率无明显影响,相比之下,细胞株HT-29、SW480的存活率随着5-FU浓度的增加而降低,最佳5-FU浓度为100μg/mL;当200μg/mL≥5-FU浓度≥20μg/mL时,5-Aza组细胞株的生存率明显低于对照组(p<0.05)。