目的:观察ADP对培养的脊髓背角小胶质细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响及作用机制。方法:培养纯化新生SD大鼠脊髓背角小胶质细胞,免疫组化观察P2Y13受体表达,激光共聚焦显微镜检测ADP作用下,小胶质细胞[Ca2+]i的变化。结果:大鼠脊髓背角小胶质细胞表达P2Y13受体,ADP可导致培养的脊髓背角小胶质细胞[Ca2+]i快速增高,且呈现剂量依赖性;P2Y13受体拮抗剂MRS2211(100μmol/L)能基本阻断ADP的作用,而P2Y1受体拮抗剂MRS2179(100μmol/L)、P2Y12受体拮抗剂MRS2395(100μmol/L)均不影响ADP致小胶质细胞[Ca2+]i升高的效应。结论:ADP可能通过P2Y13受体途径,导致培养的脊髓背角小胶质细胞[Ca2+]快速升高。
丝裂酶原活化蛋白激酶(mitogen-activated

protein kinases,MAPKs)是真核生物细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,主要包括细胞外信号调节激酶(ERKs)、c-Jun氨基末端激酶(JNKs)及P38 MAPKs三个家族,在将细胞外刺激信号转导至细胞及其核内,并引起细胞生物学反应的过程中具有至关重要的作用。P38 MAPK信号转导通路是多条并行的MAPK信号转导通路之一,参与了疼痛的形成与维持,P38 MAPK与疼痛敏感化密切相关。进一步了解P38 MAPK在疼痛敏感化机制中的作用,能够为疼痛敏感化疾病提供新的治疗靶点。
目的观察活化蛋白1(AP-1)在高糖诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用。方法将体外培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组和实验组,实验组包括22.0 mmol/L D-葡萄糖组(高糖组)、P38MAPK-shRNA慢病毒转染组、P38MAPK信号转导阻断剂组、无关shRNA转染组、AP-1抑制剂SP600125组。采用TUNEL和流式细胞术检测细胞凋亡,用EMSA检测MC3T3-E1细胞AP-1的活性。结果与正常对照组相比,高糖组MC3T3-E1成骨细胞P38MAPK表达、AP-1活性、细胞凋亡显著增加。P38MAPK-shRNA慢病毒转染组和P38MAPK信号转导阻断剂组MC3T3-E1细胞AP-1活性较高糖组分别下降57.9%(P<0.01)和45.6%(P<0.05)。AP-1抑制剂组MC3T3-E1细胞凋亡率较高糖组下降39.7%(P<0.01)。结论高糖通过激活P38MAPK增加AP-1活性,诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡,抑制AP-1活性后高糖诱导的MC3T3-E1细胞凋亡显著下降。
目的探讨大鼠星形胶质细胞气压损伤后,钠-钾-氯共转运体(NKCC)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)对水通道蛋白-4(AQP4)表达变化的影响和相关机制。方法原代培养SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞。实验分为正常对照组、气压损伤组、布美他尼处理组和p38-MAPK抑制剂(SB203580)处理组。布美他尼和p38-MAPK抑制剂均预处理星形胶质细胞30 Selleck BGB324 min后再进行气压损伤。损伤后3 h观察细胞水肿情况,并对AQP4的表达情况进行Western blot检测。结果光学显微镜下观察到气压损伤后的星形胶质细胞较正常对照组细胞明显肿胀,布美他尼和p38-MAPK抑制剂处理组星形胶质细胞水肿较气压损伤组减轻。Western

blot检测发现布美他尼处理组和p38-MAPK抑制剂处理组的AQP4表达均较气压损伤组低(P<0.05)。结论星形胶质细胞气压损伤后,AQP4表达上调受NKCC的影响,以及p38-MAPK信号途径的调节。通过抑制NKCC的活性和p38-MAPK信号途径的激活,可降低气压损伤引起的星形胶质细胞AQP4表达的上调,减轻细胞水肿。
目的研究Wnt5a在A549细胞球增殖和EMT中的作用及相关机制。方法利用无血清培养出A549细胞球后应用流式细胞术对其进行CD133+CD44+表达检测。实验分为对照组、Wn5a组、p38组和Wnt5a+p38组。应用Western Alectinib blot观察各组Wnt5a、p-p38、β-catenin、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达变化,并利用MTT和裸鼠成瘤实验观察Wnt5a shRNA慢病毒感染前后A549细胞球的生长抑制率和成瘤能力。结果流式细胞术检测A549细胞球中CD133+CD44+阳性率为60.5%;Wnt5a蛋白在Wnt5a组和Wnt5a+p38组中的表达较对照组明显下调(P<0.05),p-p38蛋白、β-catenin蛋白、Vimentin蛋白在Wnt5a组、p38组和Wnt5a+p38组的表达明显低于对照组(P<0.05),而E-cadherin蛋白在上述3组中的表达显著高于对照组(P<0.05),并且该细胞的成瘤能力较对照组显著下调。结论下调Wnt5a表达可抑制A549细胞球的增殖及EMT能力,可望成为治疗非小细胞肺癌的靶点。
背景:研究表明牙髓细胞在一定条件下经诱导可以向成牙本质细胞方向分化,该过程由信号网络调控。目的:综述牙髓细胞向成牙本质细胞方向分化的诱导因子及作用机制的研究进展。方法:应用计算机检索1998年1月至2014年7月中国知网(CNKI)和万方数据库相关文献,检索词”牙髓细胞,成牙本质细胞分化”限定文献语言种类为中文。同时计算机检索同期PubMed数据库相关文献,检索词”dental

点击此处 pulp cells,odontoblastic differentiation”,限定文献种类为英文。初检所得文献467篇。包括中文214篇,英文253篇。对于初检文献,阅读标题和摘要进行初筛,排除因研究目的与本研究无关者或内容重复性的研究,最终纳入63篇文章进行综述。结果与结论:不同的诱导因子可以作为调控器,文章系统归纳了牙髓细胞在不同的诱导因子作用下,例如:骨形态发生蛋白、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸及多种生长因子等,通过相关信号通路信号转导在一定程度上参与牙髓细胞向成牙本质细胞分化定向诱导。但成牙本质细胞分化是一个复杂的过程,进一步从细胞及分子水平研究成牙本质分化诱导因子及相关机制对于牙齿再生治疗临床应用具有重要意义。
目的探讨增强肝纤维化(ELF)试验在慢性丙肝患者肝纤维化诊断中的准确性。方法选取2011年1月~2013年4月在本院进行肝活组织检查的慢性丙型肝炎患者156例,对其临床资料进行前瞻性研究。ELF试验包括3项血清标志物的检测:透明质酸(HA)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)和Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)。采用Metavir评分系统将肝纤维化进行分期。结果在肝纤维化的诊断中,ELF=7.72时,诊断显著肝纤维化(F≥2)的ROC曲线下面积(AUROC)为0.94(95%CI:0.89~0.97),敏感性为93.0%,特异性为83.0%;ELF试验诊断显著肝纤维化的敏感性和特异性分别为93.3%和81.0%。在肝硬化的诊断中,ELF=9.