黑素细胞与角质形成细胞共培养体系中,黑素细胞与角质形成细胞间有丝状伪足相连接,黑素细胞上靠近角质形成细胞方向的丝状伪足数量多于反方向。 3.100μM MK801作用于共培养体系24h后,黑素细胞和角质形成细胞之间的丝状伪足连接数量及黑素细胞伸向角质形成细胞的丝状伪足数量减少;100μMNMDA作用于共培养体系24h,黑素细胞和角质形成细胞之间的丝状伪足连接数量及黑素细胞伸向角质形成细胞的丝状伪足数量增多。 4.共培养体系下,激光共聚焦显微镜观察NKI/BETEB抗体标记的黑素小体、细胞角蛋白14抗体标记的角质形成细胞,发现在角质形成细胞中存在黑素小体。经100μM MK801作用24h后角质形成细胞中的黑素小体数量减少,100μM NMDA作用24h后角质形成细胞中的黑素小体数量增多。且与黑素细胞不相邻的角质形成细胞中也发现黑素小体的存在。 结论: 1抑制谷氨酸受体NMDAR可使黑素细胞树突末端变窄、树突变长,黑素细胞表面的伪足数量减少、伪足长度变短;激动谷氨酸受体NMDAR可使黑素细胞树突末端变宽、树突变短,黑素细胞表面伪足数量增多、伪足长度增加。激动或抑制谷氨酸受体NMDAR对角质形成细胞影响不大。
2黑素细胞和角质形成细胞共培养体中,抑制谷氨酸受体NMDAR可以使黑素细胞和角质形成细胞之间的丝状伪足连接数量减少;激动谷氨酸受体NMDAR可以使黑素细胞和角质形成细胞之间的丝状伪足连接数量增多。
3抑制谷氨酸受体NMDAR可以使共培养体系中黑素小体的转运减少,激动谷氨酸受体NMDAR可以使共培养体系中黑素小体的转运增多。 CP-673451 花费 4谷氨酸信号通路调节黑素细胞伪足形成进一步调节黑素小体转运。
目的 探讨阿魏酸钠(SF)对柔红霉素(DNR)损伤心肌的保护效应,并探讨其机制。 方法 【体内】雄性SD大鼠,222日龄,体重60~80g,70只随机分7组(n=10)。 正常对照组(Control)、模型组(DNR)、不同剂量(12.5、25、50、100、200mg/Kg)SF干预组。Control组,大鼠腹腔注射生理盐水(NS,5ml/Kg),每周1次,共5次;DNR组、不同剂量SF干预组,5次腹腔注射均为DNR (2.5mg/Kg)。其中Control组、DNR组自第1次注射DNR开始腹腔注射NS(5ml/kg.d),不同剂量SF干预组分别腹腔注射不同剂量(12.5、25、50、100、200mg/kg.d)SF,均连续30d。各组大鼠在末次给药后第5d,取血浆测LDH和CK含量、描记分析大鼠体表心电图、左心室插管测大鼠左心室血流动力学指标(HR、LVSP、LVDP、+dp/dtmax和–dp/dtmax),取心肌组织测SOD和MDA含量、HE染色观察心肌组织学结构、电镜检测心肌细胞超微结构;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Real-time 可能 PCR检测心肌cTnI、CaM、LTCc(1aC)、SERCA2、RyR2、、Caspase9和Caspase3基因表达;免疫印迹检测心肌β-Tubulin、CaM、cTnI蛋白表达和线粒体Cyt-c释放。
【体外】采用H9C2大鼠心肌细胞株柔红霉素(DNR)1μ M处理24h,建立心肌细 胞DNR损伤体外实验模型。MTT法检测细胞存活率,检测心肌细胞培养上清LDH和CK含量,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,DCF-DA荧光试剂法检测心肌细胞内活性氧(ROS)的含量,Flou-3荧光试剂法检测心肌细胞[Ca2+]i含量,Real-time PCR检测心肌细胞cTnI、CaM、LTCc(1aC)、SERCA2、RyR2、Caspase9和Caspase3基因表达,免疫印迹检测心肌细胞β-Tubulin、CaM、cTnI、p38MAPK、细胞核NF-κ 获悉更多 B蛋白表达和线粒体Cyt-c释放。 结果 【体内】幼大鼠腹腔注射DNR5次累积剂量12.5mg/kg造成幼大鼠心肌DNR损伤, 表现为大鼠一般状态差、体重不增、甚至死亡,心肌酶外漏,体表心电图非特异性改变,左心室收缩舒张功能下降,心肌组织和心肌细胞超微结构损伤,心肌细胞凋亡,心肌组织MDA升高、SOD降低,心肌cTnI、CaM、LTCc(1aC)、SERCA2、RyR2、Caspase9和Caspase3基因表达、心肌β-Tubulin、CaM、cTnI蛋白表达改变,线粒体Cyt-c释放增加。SF干预呈剂量相关性地保护幼大鼠心肌减轻DNR损伤。 【体外】H9C2大鼠心肌细胞DNR1μ M作用24h造成心肌细胞DNR损伤,表现为心肌细胞存活率降低,细胞培养上清LDH和CK含量增高,细胞凋亡率升高,细胞内ROS、[Ca2+]i升高,cTnI、CaM、LTCc(1aC)、SERCA2、RyR2、Caspase9和Caspase3基因表达、β-Tubulin、CaM、cTnI、p38MAPK、细胞核NF-κ B蛋白表达改变,线粒体Cyt-c释放增加。SF(15.625~62.5Μm)与1μ M DNR共孵育H9C2大鼠心肌细胞24h,SF呈剂量相关性地保护心肌细胞减轻DNR损伤。 结论 1、幼大鼠腹腔注射DNR累积剂量12.